Скачать 221.8 Kb.
|
На правах рукописи ЛАЗУТКИНА Евгения Александровна Эпизоотологические особенности и эффективность специфической профилактики пневмовирусной инфекции (синдром опухшей головы) у цыплят-бройлеров 16.00.03 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Москва - 2009 Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» (ФГОУ ВПО МГАВМиБ) Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор, заслуженный деятель науки, Бессарабов Борис Филиппович Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор, лауреат премии Совета Министров СССР Сидорчук Александр Андреевич; доктор ветеринарных наук, профессор Смоленский Владимир Иванович Ведущая организация: ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности» (ВНИТИБП). Защита диссертации состоится «___»______2009 г. в «___» ч. на заседании диссертационного совета Д 220.042.01 при ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» по адресу: 109472, г.Москва, ул. Академика Скрябина, 23. Тел. (495) 377-93-83. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К.И. Скрябина» Автореферат разослан «____»___________ 2009 г. У ![]() диссертационного совета, профессор Т.Н. Грязнева ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. Птицеводство – одна из отраслей животноводства, ставшая на путь интенсивного развития. В кратчайшие сроки она вышла на передовые позиции по производству продукции – яиц и мяса птицы. Но интенсификация, в свою очередь, усилила опасность возникновения и распространения инфекционных болезней. Плотный график вакцинаций, большая концентрация птицепоголовья, большое количество инфекционных болезней и других факторов, подавляющих иммунную систему птиц, завоз новых кроссов ведут к появлению новых и изменению вирулентности и проявления уже изученных болезней вирусной этиологии (Бессарабов Б.Ф., 2001, Gough, R.E., 2004). К числу малоизученных заболеваний, недавно появившихся на территории России, необходимо отнести пневмовирусную инфекцию птиц (синдром опухшей головы). Экономический ущерб от данной болезни связан не только с падежом и выбраковкой цыплят-бройлеров, но и недополучением инкубационного яйца. Кроме того, иммуносупрессия, вызываемая пневмовирусом, делает птицу чувствительной к инфекциям, в том числе вызванным условно-патогенной микрофлорой. По данным серологических исследований, проведенных в России в 2001 году, в 40% проб сывороток крови от невакцинированной против пневмовирусной инфекции птицы были обнаружены антитела к данному заболеванию, что указывает на распространенность вируса в России (Бочков Ю.А. и др., 2002). Исследования, проведенные в 2004 году в 53 птицеводческих хозяйствах, также выявили большой процент серопозитивных птиц на территории РФ (Волкова М.А., и др., 2005). Актуальность проблемы заключается в том, что до настоящего времени не изучены эпизоотологические особенности пневмовирусной инфекции птиц, диагностика и эффективность специфической профилактики. Цели и задачи исследования. Цель работы – изучить эпизоотологические особенности пневмовирусной инфекции у цыплят-бройлеров и определить эффективность ее специфической профилактики. Для осуществления поставленной цели были определены следующие задачи:
Научная новизна. Впервые на территории Московской области в условиях птицефабрики ЗАО «Элинар-Бройлер» установлена циркуляция пневмовируса, который вызывает у кур-несушек родительского стада снижение яйценоскости на 7,2-12,2%, а у цыплят-бройлеров - развитие синдрома опухшей головы. Впервые изучены клинические, патологоанатомические, гистоморфологические особенности проявления пневмовирусной инфекции в условиях Российской Федерации. Впервые изучено влияние пневмовируса птиц на обменные процессы организма и иммунную систему цыплят-бройлеров. Практическая значимость. Разработаны лечебно-профилактические мероприятия при пневмовирусной инфекции у цыплят-бройлеров, включающие применение витаминно-аминокислотных (Гидрорексвитал) и антибактериальных (Энроколи) препаратов. Разработана и внедрена на птицефабрике «Элинар-бройлер» схема специфической профилактики пневмовирусной инфекции птиц, включающая вакцинацию родительского стада бройлеров в возрасте 85 дней живой вакциной Nemovaс (Франция) с последующей ревакцинацией в возрасте 115 дней инактивированной вакциной Нобилис TRT (Нидерланды), оценена ее экономическая эффективность. Апробация работы. Результаты исследований опубликованы в сборнике материалов III Международного ветеринарного конгресса по птицеводству (Москва, 2007) и доложены на научно-практической конференции «Болезни птиц в промышленном птицеводстве. Современное состояние, стратегия борьбы» (Санкт-Петербург, 2007). Работа была награждена дипломом. Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 2 – в журналах, рекомендованных ВАК, 3 – в сборниках научных трудов. Основные положения и результаты, выносимые на защиту: 1. Эпизоотологические показатели при пневмовирусной инфекции цыплят-бройлеров в условиях птицефабрики ЗАО «Элинар-Бройлер». 2. Особенности изменения обменных процессов в организме цыплят-бройлеров при пневмовирусной инфекции. 3. Эффективность лечебно-профилактических мероприятий при вспышке пневмовирусной инфекции у цыплят-бройлеров. 4. Схема специфической профилактики пневмовирусной инфекции и ее эффективность. Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 165 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение, выводы, сведения о практическом использовании научных результатов и рекомендации по использованию научных выводов, содержит 82 рисунка, 29 таблиц, 20 страниц приложений. Список используемой литературы включает 139 источников, в том числе 115 зарубежных авторов. Материалы и методы исследования Работа была выполнена в период 2005-2008 гг. на кафедре птицеводства и болезней птиц ФГОУ ВПО МГАВМиБ, в ЗАО «Элинар - Бройлер» Наро-Фоминского района Московской области, и независимой лаборатории «Шанс-Био» (г. Москва). Проведено изучение эпизоотического состояния птицефабрики ЗАО «Элинар-Бройлер» по пневмовирусной инфекции птиц. В сыворотке крови кур-несушек родительского стада (поголовье 16985 голов) определяли наличие антител к возбудителю пневмовирусной инфекции методом ИФА. Для этого брали по 20 проб сыворотки крови у птиц родительского стада в возрасте 159, 237 и 369 дней. Также были изучены клинические симптомы, патологоанатомические, гистоморфологические изменения, биохимический статус организма при пневмовирусной инфекции у цыплят-бройлеров. Исследования проводились в птичнике с поголовьем цыплят бройлеров 33529 голов кросса Росс-308, неблагополучном по пневмовирусной инфекции, и в птичнике с поголовьем 36000 голов, благополучном по пневмовирусной инфекции. Проведены клинические исследования и выборочная термометрия птицы обоих птичников, патологоанатомическое вскрытие 152 трупов павшей и вынужденно убитой птицы с клиническим проявлением пневмовирусной инфекции. От трупов отбирали образцы подглазничного синуса, трахеи, легких, печени, почек, тимуса, селезенки, фабрициевой сумки для гистологического исследования с окраской срезов гематоксилин-эозином. Всего было изготовлено 48 гистологических препаратов. Были проведены бактериологические исследования с использованием мясо-пептонного бульона, среды Кесслера, Эндо, Плоскирева, сред Гиса и окраска мазков по Граму; серологические исследования сыворотки крови бройлеров в ИФА (ELISA). Оценивались биохимические показатели сыворотки крови бройлеров с использованием биохимического анализатора А 25 (BioSystems): общий белок (биуретовый метод), альбумины (реакция с бромкрезоловым зеленым), железо (с использованием реактива с Ferro-Zine), щелочная фосфатаза (метод Бессея / Лоури / Брока), креатинин (метод Поппера), мочевая кислота (с использованием уриказы), фосфор (с использованием молибдата аммония) и кальций (с использованием о-крезолфталеинкомплексоном). Также определяли сохранность, живую массу, среднесуточный прирост, конверсию корма, индекс продуктивности. При оценке эффективности лечебно-профилактических мероприятий при пневмовирусной инфекции у цыплят-бройлеров были созданы 2 группы аналогов. В опытную группу было включено 31040 голов цыплят-бройлеров, в контрольную - 30720. В контрольной группе применялись препараты Эксенел и Паракокс. В опытной группе дополнительно применяли препараты Гидрорексвитал и Энроколи. В процессе эксперимента учитывали сохранность и смертность птицы, живую массу, среднесуточный прирост, конверсию корма, индекс продуктивности. При оценке эффективности специфической профилактики пневмовирусной инфекции птиц в опытной группе ремонтный молодняк родительского стада вакцинировали против пневмовирусной инфекции птиц дважды, первый раз - в возрасте 85 дней живой вакциной, Nemovaс (Франция) второй раз – в возрасте 115 дней, инактивированной вакциной Нобилис TRT(Нидерланды). Материал обрабатывали статистически по методу Меркурьевой Е.К. (1970). Результаты исследований Изучение эпизоотологического состояния ЗАО «Элинар-Бройлер» по пневмовирусной инфекции птиц На основе производственного мониторинга серологических исследований проводимых вакцинаций согласно плану противоэпизоотических мероприятий, было установлено, что птицефабрика ЗАО «Элинар-Бройлер» благополучна по острым инфекционным заболеваниям. О Рис. 1. Кривая яйценоскости кур-несушек родительского стада, неблагополучного по пневмовирусной инфекции ![]() ![]() Поэтому были проведены дополнительные серологические исследования на наличие антител к вирусным болезням по всем возрастным группам стада. Исследовали сыворотку крови кур на наличие и напряженность иммунитета к возбудителям болезни Ньюкасла и инфекционного бронхита, так как эти заболевания вызывают выраженное снижение яйценоскости у кур-несушек. Было установлено, что 100% исследованной птицы различных возрастных групп имело напряженный иммунитет к возбудителю болезни Ньюкасла (табл. 1). Таблица 1. Результаты исследования сыворотки крови родительского стада птицы в возрасте 159, 237 и 369 дней на наличие антител к болезни Ньюкасла
100% исследованного поголовья родительского стада в возрасте 159 и 237 дней и 90% исследованного поголовья в возрасте 360 дней имели антитела к возбудителю инфекционного бронхита кур (табл. 2). Таблица 2. Результаты исследования сыворотки крови родительского стада птицы в возрасте 159, 237 и 369 дней на наличие антител к инфекционному бронхиту кур
В связи с полученной информацией были проведены исследования сыворотки крови птиц на наличие антител к пневмовирусной инфекции. Антитела к пневмовирусной инфекции птиц были обнаружены у 90% птицы родительского стада в возрасте 159 дней. При этом у 20% птицы титр был низким (менее 5808), у 10% средним (5809-7000), у остальной птицы (60%) – высоким (рис. 2а). Средний титр антител составил 13385, средний геометрический титр – 4189, коэффициент вариации – 77,9%, максимальное значение титра достигало 34315.
родительского стада в возрасте 159 дней (а), 237 дней (б), 359 дней (в) и у суточных цыплят-бройлеров (г). Птица не была вакцинирована против пневмовирусной инфекции, и наличие антител в сыворотке крови указывает на циркуляцию вируса среди птиц родительского стада. В возрасте 237 дней титры антител к возбудителю пневмовирусной инфекции у родительского стада бройлеров обнаружили у 100% птицы. У 25% птиц титры находились на уровне 3814 – 5808, у 75% - превышали 7000; при этом у 45% птиц титры антител были очень высокими – более 15000. Средний титр антител к пневмовирусной инфекции птиц в данном стаде составил 14277, коэффициент вариации 68,7% (рис. 2б). Минимальное значение титров антител составило 3813, максимальное – 35578. В возрасте 369 дней антитела к возбудителю пневмовирусной инфекции регистрировали у 95% птицы (рис. 2в). У 30% птиц титр был низким (менее 5808), у 10% - средним (5809-7000), у остальной птицы (55%) - высоким. Средний титр антител составил 10494, коэффициент вариации – 78,2%, максимальное значение титра достигало 26312. В суточном возрасте материнские антитела к пневмовирусной инфекции птиц были обнаружены у 50% цыплят-бройлеров (рис. 2г). Таким образом, на основании серологических исследований сыворотки крови родительского стада и цыплят-бройлеров, подтвержденных вирусологическими исследованиями, проведенными фирмой Aviagen, был поставлен диагноз пневмовирусная инфекция птиц. Клинические признаки, патологоанатомические, гистоморфологические изменения и биохимический статус организма при пневмовирусной инфекции у цыплят-бройлеров У цыплят, больных пневмовирусной инфекцией, с 14-дневного возраста наблюдалось угнетение, повышение температуры на 1-1,50С. К 20-дневному возрасту у части цыплят отмечаются истечения из ноздрей (одно- или двухсторонний ринит). Гребешки бледно-розовые. У многих цыплят замедлялась смена пуха на первичное перо. Отмечалось воспаление и отек пери- и инфраорбитальных синусов, в глазной щели – пенистый экссудат. Пик заболевания начинается с возраста 30 дней и продолжается до возраста убоя (42 дня). У цыплят болезнь сопровождалась диареей, при этом помет имел зеленоватый цвет. У части цыплят кости ног были резиноподобными, легко ломались, кожа на ногах обесцвечивалась. У 0,5-2% цыплят наблюдались выраженные нервные симптомы: запрокидывание головы на спину (опистотонус), параличи и др. При биохимическом исследовании сыворотки крови цыплят-бройлеров в возрасте 30 суток было установлено, что у больной птицы содержание общего белка в сыворотке крови на 8,5% ниже, чем у здоровой. При этом содержание альбуминов в сыворотке крови больной птицы на 5,6% выше, чем у здоровой, а глобулинов, напротив, ниже на 27,6%, при статистической достоверности полученных результатов (Р<0,01). Также отмечалось увеличение концентрации мочевой кислоты в 3 раза по сравнению с контролем, что свидетельствует о нарушении белкового обмена в организме больной птицы. Концентрация общего белка в сыворотке крови больных птиц в терминальной стадии заболевания повышалась незначительно, в основном за счет глобулиновой фракции белков, что говорит о низком уровне антителообразования. Количество альбуминов в крови больной птицы в течение всего периода заболевания оставалось практически на одном уровне, который был незначительно выше нормы, что свидетельствует о дегидратации организма птицы. Содержание креатинина в период болезни заболевания неуклонно понижалось, при статистической достоверности полученных данных (Р<0,05). В сыворотке крови больной птицы было установлено снижение содержания фосфора и железа (Р<0,01) на 14% и 62,0% соответственно, и повышение уровня кальция на 99% по сравнению со здоровой птицей, что свидетельствует об общем нарушении обмена веществ, и, в частности, минерального обмена. При серологических исследованиях сыворотки крови цыплят-бройлеров в возрасте 33 и 40 суток был определен уровень антител к возбудителям болезни Ньюкасла и инфекционного бронхита кур, провакцинированных против этих болезней в возрасте 1 и 20 суток. Было установлено, что лишь 90% бройлеров имели антитела к возбудителю болезни Ньюкасла. Коэффициент вариации составил 65,5%, средний титр антител – 6561 (рис. 3а). Антитела к возбудителю инфекционного бронхита имели 50% птицы, средний титр составил 665, коэффициент вариации – 85,7. Минимальное значение титров составило 10, максимальное – 2149 (рис.3б).
инфекционного бронхита кур (б) При патологоанатомических и гистоморфологических исследованиях трупов павших и вынужденно убитых птиц с клиническими признаками заболевания пневмовирусной инфекцией в области головы и на дорсальной стороне шеи под подкожной соединительной тканью были обнаружены отложения серозного или фибринозного экссудата. В инфраорбитальном синусе также отмечали скопления фибринозного экссудата. В трахее - геморрагическое воспаление, в основном в ее верхней части. У части цыплят отмечали перикардит и перигепатит. Печень была увеличена, перерождена, с закругленными концами и кровоизлияниями, в почках и мочеточниках обнаруживали отложение мочекислых солей и зернистую дистрофию эпителия мочевых канальцев, на коже крыла отмечали дерматиты. Значительные изменения были обнаружены в иммунных органах: лимфатические фолликулы селезенки были обеднены лимфоцитами, в фабрициевой сумке отмечали формирование микрокист в слизистой оболочке и прорастание междольковой соединительной ткани жировыми клетками, в тимусе – инверсию слоев и активное образование телец Гассаля. Были проведены бактериологические исследования патологического материала, взятого от павших и вынужденно убитых цыплят-бройлеров, в условиях Наро-фоминской районной ветеринарной лаборатории. Из головного мозга, сердца и печени у 60% цыплят была выделена Salmonella gallisepticum, чувствительная к тилану, эксинелу, энроксилу. Также из внутренних органов были выделены бактерии E.coli в ассоциации с S. aureus. Указанные бактерии были чувствительны к эксинелу, эриприму, энроксилу. Смертность у бройлеров была максимальна в возрасте 2 недель, затем постепенно снижалась. Выбраковка, напротив, достигала максимума в возрасте 4 недель, что было связано прежде всего с началом клинического проявления пневмовирусной инфекции, и оставалась на высоком уровне до убоя птицы в возрасте 42 дней (рис.3). А Рис.3. Динамика падежа и выбраковки у цыплят-бройлеров при пневмовирусной инфекции ![]() Таблица 3. Зоотехнические показатели выращивания при пневмовирусной инфекции у цыплят-бройлеров
Эффективность лечебно-профилактических мероприятий при пневмовирусной инфекции Проводимые лечебно-профилактические мероприятия при данном заболевании, включающие применение препаратов Гидрорексвитал в возрасте 2-5 суток и Энроколи в возрасте 24-26 дней, были достаточно эффективны. Хотя их проведение полностью не предотвращало проявление пневмовирусной инфекции, но снизило процент выбраковки на 3,9%, увеличило живую массу цыплят на 116 г, и, следовательно, экономически выгодно при выращивании птицы (табл. 4). Таблица 4. Производственные показатели выращивания цыплят-бройлеров
Эффективность специфической профилактики при пневмовирусной инфекции у цыплят-бройлеров Птица родительского стада провакцинирована против пневмовирусной инфекции дважды, в возрасте 85 дней живой вакциной Nemovaс методом спрей, и в возрасте 115 дней – инактивированной вакциной Нобилис TRT, подкожно, в область шеи. От этой птицы в возрасте 146 дней была взята сыворотка крови для определения наличия антител к возбудителю пневмовирусной инфекции. Средний титр антител у родительского стада бройлеров достигал 24883, минимальное значение его было на уровне 2055, максимальное- 41489, при коэффициенте вариации 56,1%. В суточном возрасте цыплята-бройлеры, полученные от вакцинированного стада, имели следующие материнские титры антител к пневмовирусной инфекции: среднее значение титра к пневмовирусной инфекции было на уровне 3286, максимальное значение титра достигало 6192, минимальное – 959, при коэффициенте вариации 53,1. Антитела обнаруживались в 100% исследованных проб. На протяжении периода выращивания (40 дней) клинические признаки, характерные для пневмовирусной инфекции, у цыплят-бройлеров не наблюдались. Таким образом, двукратная вакцинация птиц родительского стада защищает полученных от него цыплят-бройлеров от клинического проявления пневмовирусной инфекции. В период эксплуатации птиц родительского стада, вакцинированных против пневмовирусной инфекции, их яйценоскость была выше нормативных показателей, установленных для кросса Росс-308, в среднем на 4-6 %. Выводы
СВЕДЕНИЯ О ПРАКТИЧЕСКОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ Предложенная схема вакцинации успешно внедрена в птицехозяйстве ЗАО «Элинар-Бройлер» и применяется для профилактики пневмовирусной инфекции у цыплят-бройлеров. Результаты, полученные при изучении проявления пневмовирусной инфекции птиц у цыплят-бройлеров, используются в учебном процессе в ФГОУ ВПО МГАВМиБ при изучении дисциплины «Болезни птиц». РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ Изученные эпизоотологические особенности, а также особенности клинического, патологоанатомического проявления пневмовирусной инфекции птиц, а также ее влияние на иммунную систему птиц рекомендуется учитывать при диагностике указанного заболевания, а также при проведении специфической профилактики инфекционных болезней птиц в птицехозяйствах. При вспышке пневмовирусной инфекции рекомендуется применение лекарственных препаратов: Эксенел, Гидрорексвитал, Энроколи. Для профилактики пневмовирусной инфекции рекомендуется двукратная вакцинация родительского стада: в возрасте 85 дней живой вакциной, и в возрасте 115 дней инактивированной вакциной против пневмовирусной инфекции птиц. Список работ, опубликованных по теме диссертации 1. Бессарабов Б.Ф. Пневмовирусы птиц: учебное пособие / Б.Ф. Бессарабов, Е.А. Лазуткина, И.И. Мельникова. – М.: МТА-Графикс. – 2008 - 32 с. 2. Влияние пневмовируса птиц на состояние иммунной системы цыплят-бройлеров / Б.Ф. Бессарабов, Е.А. Лазуткина, И.И. Мельникова, и др. // Болезни птиц в промышленном птицеводстве. Современное состояние, проблемы и стратегия борьбы. Сб.науч.тр. – СПб.: ГНУ ВНИВИП.- 2007. – С. 129-138. 3. Лазуткина Е.А. Ветеринарно-санитарные мероприятия при синдроме опухшей головы у цыплят-бройлеров / Е.А. Лазуткина, Б.Ф. Бессарабов, И.И. Мельникова // Птицеводство. – 2007. - № 10. – С. 35-36. 4. Лазуткина Е.А. Диагностика синдрома опухшей головы у цыплят-бройлеров / Е.А. Лазуткина // Птицеводство. – 2007. - № 7. – С. 44-45. 5. Лазуткина Е.А. Клинические признаки, патологоанатомические и гистоморфологические изменения при синдроме опухшей головы у цыплят-бройлеров/ Е.А. Лазуткина, Б.Ф. Бессарабов // Материалы III международного ветеринарного конгресса по птицеводству. – М.: НПП «АВИВАК». - 2007. – С. 111-116. 6. Пневмовирусы птиц / Б.Ф. Бессарабов, Е.А. Лазуткина, И.И.Мельникова и др. // Материалы III международного ветеринарного конгресса по птицеводству. – М.: НПП «АВИВАК». - 2007. – С. 78-84. 7. Лазуткина Е.А. Особенности проявления синдрома опухшей головы у цыплят-бройлеров / Е.А. Лазуткина, Б.Ф. Бессарабов, И.И.Мельникова// Био. - 2007. - № 6 (81). – С. 31-34. |