Удк: 616-017. 1: 616. 33/34-085 icon

Удк: 616-017. 1: 616. 33/34-085





Скачать 311.65 Kb.
НазваниеУдк: 616-017. 1: 616. 33/34-085
Дата конвертации19.06.2013
Размер311.65 Kb.
ТипАвтореферат
АКАДЕМИЯ НАУК РЕСПУБЛИКИ УЗБЕКИСТАН

ИНСТИТУТ ИММУНОЛОГИИ


На правах рукописи

УДК: 616-017.1:616.33/34-085


БАКИЕВА Мукаддам Камаловна


МЕХАНИЗМЫ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩЕГО ЭФФЕКТА

ПРПАРАТА «ВИУСИД» ПРИ ВТОРИЧНОЙ ИММУННОЙ

НЕДОСТАТОЧНОСТИ В КЛИНИКЕ И В ЭКСПЕРИМЕНТЕ


14.00.36 - аллергология и иммунология


АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук


Ташкент - 2008


Работа выполнена в Институте иммунологии АН РУз


Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор

Рузыбакиев Руслан Махмудович







Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор

Исмаилова Гули Аминджановна










доктор медицинских наук, профессор

Бабаходжаев Сироджиддин Насирович













Ведущая организация:

Ташкентский педиатрический

медицинский институт











Защита диссертации состоится «_____»____________2008 г в_______час. на заседании специализированного совета Д 015.89.01 при Институте иммунологии АН РУз по адресу: 100060, г. Ташкент, ул. Я. Гулямова, 74.



С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института иммунологии АН РУз.


Автореферат разослан «____»_____________________2008 года.


Ученый секретарь

Специализированного совета

кандидат медицинских наук Умарова Адолат Абдурахимовна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ


Актуальность проблемы. В настоящее время отмечается значительный рост числа заболеваний, обусловленных нарушениями в системе иммунитета, которые в свою очередь, влияют на особенности и тяжесть течения различных болезней (Фрейдлин И.С., 1998; Смирнов В.С. с соавт., 2000).

Формированию на фоне дисфункции иммунной системы вторичной иммунной недостаточности (ВИН) могут способствовать многочисленные факторы инфекционной и неинфекционной природы, загрязнение окружающей среды, острые и хронические стрессы, нарушение питания, длительное применение медикаментов, обладающих иммунодепрессивными свойствами, физические и психоэмоциональные травмы и многие другие (Понякина И.Д., 2003).

Нарушение нормального функционирования иммунной системы определяет более тяжелое, затяжное течение любых болезней: инфекционных, хирургических, бронхолегочных, сердечно-сосудистых, нейроэндокринных и других, способствует генерализации воспалительных процессов, развитию осложнений, снижению и/или отсутствию клинического эффекта на проведение терапии (Новиков Д.К. с соавт., 2003, 2004).

Актуальность проблемы иммунодефицитов связана также и с отсутствием обоснованных, отработанных, единых клинико-иммунологических концепций и методологии по их диагностики, лечению и профилактике (Петров Р.В. с соавт., 1997; Сепиашвили Р.И., 2001).

Степень изученности проблемы. На сегодняшний день вопрос адекватной иммунокоррекции остается открытым, что во многом обусловлено тем, что при всех перечисленных выше патологиях происходит закономерная метаболическая интоксикация. И сдерживающим фактором применения выпускаемых сегодня иммунокорректоров зачастую является их все еще относительно высокая токсичность, либо наличие побочных эффектов различного проявления (Воробьев А.А., 2002; Новиков Д.К. с соавт., 2002).

Одним из перспективных направлений в решении проблемы лечения нарушений в иммунной системе при иммунодефицитных состояниях является использование различных биологически активных добавок к пище (БАД), которые находят широкое применение в практической медицине (Лоранская Т.И., 1997; Беспалов В.Г. с соавт., 1998; Васильев А.В. с соавт., 2000; Дектярёва Е.А., 2000; Некрасова В., 2000; Маганова Н.Б., 2004). Биологические эффекты БАДов зависят от композиции и количества ингредиентов, входящих в их состав (Горелова Ж.Ю., 2002; Сайдахмедова З.Т. с соавт., 2005). Они оказывают модулирующее воздействие на функции разных систем организма (Мазо В.К. с соавт., 1999; Гаппаров М.М., 1999; Закирходжаев Ш.Я. с соавт., 2000; Кушнерева Н.Ф. с соавт., 2000; Здольник Т.Д., 2001; Дектярева Т.Д. с соавт., 2001).

Выше рассмотренные работы показывают перспективность применения БАДов для восстановления нарушенного гомеостаза организма при патологических процессах различной этиологии. Вместе с тем, в литературе мало сведений о механизме влияния БАДов на иммунологическую реактивность организма при той или иной патологии, о конкретных мишенях в иммунной системе, на которые воздействуют ингредиенты, входящие в состав БАДов.

Резюмируя данные по изучаемой проблеме, полученные при критическом анализе литературных источников, следует заключить, что несмотря на видимое разнообразие, остается острая нужда в иммуномодулирующих препаратах, которые могли бы сочетать в себе ощутимый корригирующий эффект и минимальное отрицательное действие.

В рамках поиска новых иммунотропных препаратов представляет интерес БАД «Виусид» фирмы «Лайф Ремеди» (США).

В связи с вышесказанным изучение влияния «Виусида» на состояние иммунной системы является весьма актуальным. Однако, несмотря на обнаруженный клинический эффект, механизмы иммуностимулирующей активности «Виусида» до настоящего времени не установлены.

Связь диссертационной работы с тематическими планами НИР. Работа выполнена в соответствии с планами научно-исследовательских работ Института иммунологии АН РУз.

Цель исследования. Оценка иммунотропных свойств препарата «Виусид» в условиях вторичной иммунологической недостаточности в эксперименте и при патологическом состоянии, сопровождающимся снижением функции иммунной системы в клинике.

Задачи исследования.

1. Изучить влияние «Виусида» на величину иммунного ответа в эксперименте у разных видов животных.

2. Сравнить степень влияния препарата «Виусид» на антителогенез на различных моделях вторичной иммунологической недостаточности: острый токсический гепатит, анемия, супрессия имураном, голодание.

3. Изучить влияние препарата «Виусид» на антителообразование в системе in vitro.

4. Оценить влияние «Виусида» на процесс пролиферации кроветворных стволовых клеток.

5. Дать оценку эффективности препарата «Виусид» при лечении больных острым вирусным гепатитом В.

Объект и предмет исследования. Обследовано 43 больных острым вирусным гепатитом В и 27 практически здоровых людей (контроль). В экспериментах использованы белые беспородные мыши.

Методы исследования. В работе использованы методы клинической и экспериментальной иммунологии.


Основные положения, выносимые на защиту.

1. «Виусид» обладает свойством в 2,5-3 раза повышать иммунный ответ у мышей и крыс с полноценной иммунной системой (интактные животные).

2. «Виусид» корригирует вторичный иммунодефицит, развивающийся при остром токсической гепатите, гемолитической анемии, голодании и иммунодепрессии, вызванной имураном.

3. Использование «Виусида» в комплексном лечении больных острым вирусным гепатитом В позволяет проводить эффективную коррекцию нарушенных показателей иммунной системы, что приводит к положительным сдвигам со стороны лабораторных признаков ВГВ и повышает качество патогенетической терапии.

Научная новизна.

Впервые проведено целенаправленное изучение воздействия препарата «Виусид» на иммунологические процессы, происходящие в организме экспериментальных животных, а также изучено его влияние на функции иммунокомпетентных клеток человека в условиях иммунодефицитных состояний.

Установлено, что «Виусид» в 2,5-3,1 раза повышает иммунный ответ к эритроцитам барана у интактных мышей и крыс.

Показано, что «Виусид» обладает свойством существенно повышать антителогенез у животных с вторичными иммунодефицитами: острый токсический гепатит, иммунодепрессия, вызванная имураном, гемолитическая анемия и голодание в системе in vivo и in vitro.

Обнаружено, что «Виусид» в несколько раз усиливает пролиферативную активность кроветворных стволовых клеток.

Установлено, что у больных с острым вирусным гепатитом В «Виусид» способствует нормализации уровня продукции факторов межклеточного взаимодействия – IL-1β, IL-8, INFγ, повышению содержания Т-лимфоцитов (CD3+), Т-хелперов/индукторов (CD4+), лимфоцитов с рецептором к апоптозу (CD95+), активированных лимфоцитов (CDHLA DR+) и снижению количества натуральных киллеров (CD16+)-лимфоцитов.

Научная и практическая значимость результатов исследования состоит в том, что обнаруженные иммунобиологические свойства «Виусида» позволяют использовать его в терапии больных, у которых имеют место повреждение иммунной системы.

Кроме того, ценным с практической точки зрения является проявление иммунокоррегирующих свойств «Виусида» непосредственно в условиях угнетения деятельности иммунокомпетентных элементов крови, т.е. избирательное действие на клетки с пониженной функциональной активностью.

Реализация результатов. Результаты экспериментальных исследований внедрены в деятельность кафедры фармакологии и медицинской формации Ташкентского фармацевтического института.

Апробация работы. Основные положения диссертации представлены на конференции молодых ученых «Актуальные проблемы иммунологии и аллергологии» (Ташкент, 2001); на симпозиуме, посвященном результатам научных исследований препарата «Виусид» институтами Минздрава Республики Узбекистан (Ташкент, 2001); на конференции молодых ученых (Ташкент, 2003), межлабораторной апробации и межвузовском семинаре в Институте иммунологии АН РУз (Ташкент, 2008).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 работ, среди них 2 журнальные статьи, 4 тезиса и 1 методические рекомендации.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 122 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, 3 глав собственных исследований, обсуждения, выводов и практических рекомендаций. Диссертация иллюстрирована 26 таблицами и 6 рисунками. Библиографический указатель включает 164 источников литературы, из которых 51 дальнего зарубежья.


ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ


Во введении обоснована актуальность темы исследований, сформулированы цель и задачи работы, основные положения, выносимые на защиту, научная новизна, научно-практическая значимость результатов исследований, реализация и апробация работы, объем и структура диссертации.

В первой главе «Обзор литературы» приводятся данные, касающиеся современных подходов к оценке состояния иммунной системы и проблемы коррекции иммунодефицитных состояний.

Во второй главе описаны материал и методы исследования. В опытах использовали белых беспородных мышей 2-3 мес. возраста массой 20-22 г в количестве 116 шт. и 20 белых беспородных крыс массой 150-180 г. Животные содержались на стандартном рационе вивария. В качестве источника комплемента использовали морских свинок.

Всего обследовано 70 человек в возрасте 23-45 лет. Среди них 27 здоровых человек в возрасте от 18 до 55 лет, средний возраст составил 35,2 ± 1,4 и 43 больных с острым вирусным гепатитом В (ВГВ) - возраст в среднем – 32,5 ± 1,8. Из них 18 мужчин и 25 женщин.

Диагноз острого вирусного гепатита устанавливался при помощи стандартных клинико-биохимических методов обследования больных, находящихся в инфекционном отделении при кафедре инфекционных заболеваний ТашГосМИ-1, и верифицировался обнаружением с помощью иммуноферментных методов и метода полимеразной цепной реакции специфических маркеров вирусных инфекций (HbsAg, HbeAg, HbcorAg, ДНК вируса гепатита В).

Клинический диагноз устанавливали на основании анамнестических данных, жалоб больного, клинических проявлений и данных лабораторного исследования (ПЦР-диагностика, общий билирубин и его фракции, АСАТ, АЛАТ, щелочная фосфатаза, общий белок, белковые фракции, тимоловая проба).

В качестве антигена использовали эритроциты барана (ЭБ). Перед иммунизацией ЭБ двукратно отмывали в среде 199 центрифугированием при 1000 оборотов в течение 10 минут. Затем в камере Горяева подсчитывали количество эритроцитов в 1мл. Животным ЭБ вводили однократно внутрибрюшинно в дозе 2107 или 2108 в объеме 0,5 мл.

Суспензии клеток селезенки готовили следующим образом. После забоя селезенки животных помещали в 5 мл среду №199, затем измельчали в стеклянном гомогенизаторе и фильтровали через капроновые фильтры. Затем в селезенке подсчитывали число ядросодержащих клеток селезенки (ЯСКС).

Количество антителообразующих клеток (АОК) определяли прямым методом локального гемолиза в агарозе по Jerne и Nordin (1963). Для этого готовили 0,6% раствор агарозы на однократном растворе Хенкса при температуре +49°С-50°С. Затем в пластиковые чашки диаметром 40 мм наливали 1 мл раствора агарозы, 0,03 мл 20% раствора ЭБ и 0,1 мл суспензии клеток селезенки. Чашки помещали в термостат при температуре +37С на 1,5 часа. Затем в каждую чашку добавляли по 1 мл раствора комплемента морской свинки, разведенной физ. раствором в соотношении 1:20. Через 1 час комплемент сливали и на чашках подсчитывали число зон гемолиза (бляшки). В центре каждой бляшки находится одна АОК. Число АОК рассчитывали на всю селезенку и на 1 млн. ЯСКС. Для этого число АОК на весь орган делили на общее количество клеток селезенки.

В ряде опытов изучали влияние препарата на число АОК в системе in vitro. Для этого на 5-е сутки после иммунизации к клеткам селезенки добавляли препарат и инкубировали 30 минут при +37С, после чего определяли число АОК.

Определение кроветворных стволовых клеток методом эндогенного колониеобразования. Мышей облучали тотально в сублетальной дозе 6,5 Грей на аппарате РУМ-17. На 9-е сутки после облучения мышей забивали, извлекали селезенки и помещали их в фиксатор Буэна (15 частей насыщенного водного раствора пикриновой кислоты +5 частей 10% раствора формалина +1 часть ледяной уксусной кислоты). Затем на поверхности селезенки подсчитывали дискретные колонии (узелки). В данной модели колонии образуются из стволовых клеток, выживших после сублетального облучения (Тилл, МакКуллох, 1963).

Острый токсический гепатит (ОТГ) у мышей вызывали с помощью гепатотропного яда - четыреххлористого углерода (CCl4), который вводили в течение 3-х дней в виде 20% масляного раствора подкожно по 0,2 мл.

Иммунодепрессор имуран широко используется в трансплантологии. Для моделирования вторичного иммунодефицита мышам в течение 3-х дней внутрибрюшинно вводили имуран в дозе 50 мг/кг. Затем иммунизировали ЭБ и еще через 5 дней определяли число АОК в селезенке.

Для моделирования гемолитической анемии мышам в течение 3-х дней ежедневно внутрибрюшинно вводили солянокислый фенилгидразин в дозе 30 мг/кг. При этом возникает не только анемия, но и формируется вторичный иммунодефицит.

Вторичный иммунодефицит создавали путем содержания мышей в течение 3-х дней на голодной диете, с дачей только питьевой воды.

«Виусид» предлагается во флаконах из темного стекла по 100 мл в картонной упаковке 1 шт., а также в форме легко растворимого порошка по 4,5 г в пакетике. Содержимое одного пакетика 4,5 г. соответствует: кислота малеиновая-2 г, кислота аскорбиновая-0,06 г, глицирризиновая кислота-0,1г, кислота фолиевая-200 мкг, цианкобаламин (витамин В12)-1,0 мкг, пантоненат кальция-0,0036 г, сульфат цинка-0,015 г, аргинин-2,0 г, глизин-1,0 г, глюкозамин-2,0 г, пиридоксаль (витамин В6), метилпарабен метил-пара-гидрокси-бензонат натрия, мед, лимон, мята.

«Виусид» разводили в физ. растворе и вводили мышам и крысам через зонд внутрижелудочно в дозе 1 мг/кг или 10 мг/кг. В экспериментах in vitro «Виусид» добавляли к клеткам селезенки в дозе 1 мкг/мл.

Оценка иммунного статуса по современным понятиям подразумевает комплексное изучение иммунной системы, включающее тестирование ее важнейших функциональных звеньев. Это определение клеточных и гуморальных звеньев иммунитета, неспецифических факторов защиты. Кровь для исследования забирали из локтевой вены в пробирки с гепарином (25 ед/мл).

Одновременно подсчитывали в камере Горяева количество лейкоцитов и лимфоцитов 1 мкл цельной крови. Выделение лимфоцитов из венозной крови проводили по общепринятому методу Boyum A. в градиенте плотности фиколл-верографина (1,077).

Содержание популяционного состава лимфоцитов в периферической крови определяли при помощи моноклональных антител к маркерам СD3 (Т-лимфоциты), СD4 (Т-хелперы/индукторы), СD8 (Т-супрессоры/ цитотоксические), СD16 (натуральные киллеры), СD20 (В-лимфоциты), CD25 (лимфоциты с рецептором к IL-2), CD95 (лимфоциты с рецептором к апоптозу), CD HLA-DR (лимфоциты главного комплекса гистосовместимости) методом непрямого розеткообразования.

Количество образовавшихся розеток выражали в процентах (относительный показатель). Абсолютное число в 1 мкл крови определяли по формуле: а  б  в /10000 - где а - число лейкоцитов в 1 мкл крови, б - процент лимфоцитов в крови, в - процент популяции лимфоцитов.

Продукция цитокинов определялась путем исследования выработки IL-1, IL-8 и ИФН- в сыворотке крови с помощью иммуноферментного метода. Для определения IL-1, IL-8, ИФН- использовали тест системы ООО ”Цитокин” (Санкт-Петербург, Россия).

Содержание иммуноглобулинов определяли методом радиальной иммунодиффузии по Manchini (1969) с применением моноспецифических сывороток Российского производства Московского института микробиологии и эпидемиологии им. Н.Ф.Гамалеи. Содержание иммуноглобулинов выражали в мг/%.

При определении уровня ЦИК в сыворотке крови использовали тест-набор Ташкентского малого предприятия “Нихол”. Метод основан на нефелометрии различной растворимости мономеров иммуноглобулинов в составе иммунных комплексов при наличии в среде полиэтиленгликоля (ПЭГ-6000).

Фагоцитарную активность лейкоцитов определяли путем инкубации смеси лейкоцитов и латексных частиц в термостате при 37°С 30 мин. Подсчитывали количество нейтрофилов, поглотивших латексные частицы. Полученные результаты выражали в %. В работе использовали меламиноформальдегидный латекс (1,5 микрон) производства Российского научно-исследовательского института биологического приборостроения.

Результаты исследований обрабатывались методом вариационной статистики. Статистическую обработку фактического материала и графические изображения проводились на ЭВМ с использованием программных средств MS Excel 4,0. Достоверность данных оценивали с помощью критерия достоверности (t).

В третьей главе приведены результаты экспериментального исследования пищевой добавки «Виусид», в состав которой входят аминокислоты, микроэлементы, ряд других компонентов и пчелиный яд. Экспериментальные исследования показали, что однократное внутрижелудочное введение «Виусида» мышам в 1,5 раза усиливает иммунный ответ к ЭБ. Предварительное (до иммунизации) введение препарата усиливает иммунный ответ в 2 раза, а при введении «Виусида» до и после иммунизации - в 2,6 раза.

Более выраженная иммуностимуляция (в 3,1 раза) обнаружена у крыс. На основании полученных данных можно сделать вывод о том, что «Виусид» способен повышать иммунологическую реактивность у животных с полноценной иммунной системой за счет активации пролиферативных, миграционных и дифференцировочных свойств иммунокомпетентных клеток.

После этого мы изучали эффект «Виусида» на иммунологическую реактивность у животных с вторичными иммунодефицитными состояниями.

В первой модели иммунодефицит создавался путем обработки мышей гепатотропным ядом – CCL4.

В наших исследованиях у мышей с ОТГ иммунный ответ к ЭБ снижался в 3,7 раза. Проведение курса лечения «Виусидом» в дозе 1 мг/кг в 2,2 раза повышало антителогенез в селезенке, хотя уровень АОК был достоверно ниже контроля. В тоже время «Виусид» в дозе 10 мг/кг полностью восстанавливал иммунологическую реактивность иммунодефицитных мышей. Очевидно, в механизме иммуностимуляции при ОТГ лежат те же процессы, обнаруженные и у животных с полноценной иммунной системой. Прирост числа АОК в селезенке возможен за счет разблокирования резервной популяции антителосинтезирующих клеток или интенсификации всех этапов формирования иммунного ответа к ЭБ.

Во второй модели вторичный иммунодефицит у мышей формировался после их обработки иммунодепрессантом имураном. При этом иммунный ответ к ЭБ снижается в 3 раза, т.е. в меньшей степени, чем при ОТГ. Проведение курса лечения «Виусидом» в дозах 1 и 10 мг/кг соответственно в 2,1 и 2,5 раза повышает угнетенный иммунный ответ к ЭБ, при этом высокая доза препарата полностью восстанавливает иммунологическую реактивность организма.

Таким образом, на двух моделях вторичных иммунодефицитных состояний обнаружена высокая иммуностимулирующая активность «Виусида». Вероятно, иммуномодулирующий эффект связан с комплексным воздействием компонентов, входящих в состав препарата, на Т- и В- звенья иммунитета, на продукцию медиаторов иммунитета, участвующих в процессах межклеточного взаимодействия, созревания разных субпопуляций иммуноцитов.

В третьей модели иммунодефицит формировался после обработки мышей гемолитическим ядом – солянокислым фенилгидразином, в результате чего иммунный ответ к ЭБ снижался в 3,5 раза. У животных, получивших «Виусид» в дозе 1 мг/кг, иммунный ответ повышается в 1,9 раза, а при дозе 10 мг/кг – в 3 раза. Как видно во всех 3-х моделях иммунодефицитов препарат в дозе 10 мг/кг полностью восстанавливает иммунологическую реактивность организма.

В последней серии иммунодефицит моделировали путем содержания мышей в течение 3-х дней на голодной диете, что привело к резкому (в 3,9 раза) угнетению продукции АОК в селезенке. «Виусид» в дозе 1 мг/кг в 2,4 раза, а при 10 мг/кг – в 3,6 раза усиливает антителогенез в селезенке иммунодефицитных мышей.

Таким образом, на всех 4-х моделях вторичных иммунодефицитных состояний «Виусид» оказывает одинаковый иммуностимулирующий эффект, полностью восстанавливая иммунологические потенции организма. Принимая во внимание, что иммунодефициты были различной этиологии, можно с достаточной уверенностью утверждать, что «Виусид» способен корригировать нарушения в работе иммунной системы при многих иммунозависимых заболеваниях инфекционной, соматической природы. Назначение «Виусида» может быть полезным в хирургической практике, при лечении онкологических заболеваний и токсических поражений. Являясь нетоксичным, легко усвояемым препаратом, «Виусид» может быть рекомендован и как профилактическое средство для повышения иммунной реактивности организма при стрессовых состояниях (сезонного, эмоционального характера), в периоды опасности возникновения вирусных и бактериальных инфекционных заболеваний и т.д.

Исследования, проведенные у животных с полноценной иммунной системой и со вторичными иммунодефицитными состояниями не позволяют точно ответить на вопрос: на какие звенья иммунной системы (Т- и В- система иммунитета) или функции разных типов иммунокомпетентных клеток действуют компоненты, входящие в состав «Виусида»? Использованная методика (подсчет АОК в селезенке) позволяет фиксировать только конечный результат сложных, взаимосвязанных иммунологических реакций, возникающих вслед за введением в организм антигена.

Поэтому большую информацию можно получить при исследовании эффекта Виусида в системе in vitro, при которой происходит непосредственный контакт исследуемого препарата с конкретной популяцией иммуноцитов, в частности, с плазматическими клетками-продуцентами антител.

В последующих сериях был проанализирован эффект «Виусида» в системе in vitro на популяцию АОК, взятых от животных с полноценной иммунной системой и с вторичными иммунодефицитными состояниями.

Установлено, что 30-ти минутное инкубирование клеток селезенки, взятых от интактных мышей на пике иммунного ответа, с «Виусидом» в дозе 1 мкг/мл в 1,5 раза повышает число АОК. Если же для анализа взять спленоциты от животных с ОТГ, то «Виусид» повышает число АОК в 3,2 раза, т.е. до контрольных показателей интактных животных.

Полученные данные говорят о том, что 30-ти минутный контакт «Виусида» с иммуноцитами оказался достаточным для проявления его иммуностимулнрующего эффекта. Вероятно, это происходит за счет непосредственного влияния аминокислот или микроэлементов, входящих в состав препарата, на плазматические клетки. В пользу этого говорят данные, полученные Cunningham-Rundees et al. (1980), изучавшими влияние цинка на лимфоидные клетки человека в системе in vitro методом подсчета бляшкообразующих клеток. Спустя 6 дней после добавления цинка в культуру клеток интактных доноров, они приобретали способность вызывать лизис ЭБ. Подсчет АОК позволил сделать вывод, что цинк является активатором В-лимфоцитов, так же, как и митоген лаконоса.

Далее были изучены эффект «Виусида» на антителогенез in vitro у мышей с вторичным иммунодефицитом, индуцированным имураном. Установлено, что в суспензии клеток селезенки иммунодефицитных мышей АОК содержится в 2,4 раза меньше, чем у интактных животных. Добавление в культуру клеток «Виусида» в 2 раза повышает число АОК. Отсюда следует вывод, что при иммунодефиците вызванном имураном также как и при ОТГ, инкубирование спленоцитов иммунизированных мышей с «Виусидом», повышает число плазматических клеток-продуцентов антител к ЭБ.

В 3-й серии опытов in vitro использовали спленоциты мышей с гемолитической анемией, предварительно иммунизированных ЭБ. Оказалось, что у анемичных мышей резко (в 3,8 раза) угнетается продукция АОК. Если же к суспензии клеток анемичных мышей добавить «Виусид» в дозе 1 мкг/мл, то это способствует 3-х кратному приросту АОК. Следовательно, и в данной модели вторичного иммунодефицита, «Виусид» in vitro способен стимулировать антителогенез.

В последней 4-й модели вторичного иммунодефицитного состояния оценивали эффект «Виусида» в системе in vitro у мышей, подвергнутых в течение 3-х дней голоданию. У мышей после стресс-фактора (голодание) в суспензии клеток селезенок число АОК уменьшилось в 3,2 раза, по сравнению с нормальными животными. Добавление в культуру клеток «Виусида» в 3 раза повысило иммуногенез.

Опыты, проведенные в системе in vitro доказали способность «Виусида» вовлекать в процесс антителообразования дополнительный резерв антителопродуцентов («молчащие» АОК). Можно предположить, что при вторичных иммунодефицитных состояниях, уменьшение числа АОК не является абсолютным. На самом деле, вероятно, увеличивается популяция заблокированных «молчащих» АОК в результате воздействия на организм токсических веществ (CCL4, солянокислый фенилгидразин, имуран) или стресс-факторов (голодание). Введение «Виусида» способствует снятию блока с «молчащих» АОК и они начинают выработку антител к ЭБ.

На основании экспериментов, проведенных в системе in vivo и in vitro можно сделать заключение о том, что пищевая добавка «Виусид» оказывает позитивное воздействие на иммунную систему. Это доказывается и экспериментами, в которых «Виусид» вводился в течение нескольких дней до антигенного стимула, и это существенно стимулировало иммунологическую реактивность организма.

Одной из важнейших популяций иммунной системы является кроветворные стволовые клетки - родоначальницы всех клеточных элементов иммунной и кроветворной систем.

Нами проведены исследования по изучению эффекта «Виусида» на пролиферативные свойства кроветворных стволовых клеток на модели эндогенного клонирования у сублетально облученных мышей. Достаточно простая в техническом отношении, данная методика позволяет точно установить какое воздействие на пролиферацию стволовых клеток оказывает исследуемый препарат (угнетение, стимуляция или отсутствие какого-либо эффекта).

В опытах установлено, что введение «Виусида» в течение 3-х дней после сублетального облучения в дозах 1 и 10 мг/кг в 1,8 раза и 2,6 раза соответственно увеличило число колоний на поверхности селезенки мышей. Отсюда следует вывод, что одной из мишеней в иммунной системе для «Виусида» являются кроветворные стволовые клетки. Можно предположить, что компоненты «Виусида» связываются с определенными рецепторами стволовых клеток после чего они начинают интенсивно пролиферировать. Не исключено также, опосредованное воздействие «Виусида» на стволовые клетки через популяцию лимфоцитов, контролирующих функции стволовых клеток. Такие лимфоциты контролируют дифференцировку кроветворных стволовых клеток в эритроидном (Sharkis et al., 1978) и гранулоцитарном направлениях (Манько В. М., 1978).

В этом плане «Виусид» обладает способностью восстанавливать нарушенные функции иммунной системы, в частности подавлять развитие иммунопатологического процесса путем активации иммунорегуляторных клеток, стимулировать фагоциты и продукцию противовирусных антител.

Таким образом, экспериментальные исследования убедительно доказали, что «Виусид», помимо своего прямого применения в качестве пищевой добавки, может быть использован и как иммунопотенцирующий препарат, обладающий широким спектром воздействия на иммунную систему, начиная с пула кроветворных стволовых клеток, и кончая популяцией плазматических клеток-продуцентов антител.

В четвертой главе приводятся результаты клинических исследований. Известно, что организм наделен весьма чувствительным иммунным аппаратом, способным распознать чужеродные антигены. Известно также, что резистентность организма к инфекции (и вообще к чужеродным антигенам) определяется его генотипом (Фрейллин И.С., 1996-2000). По данным ряда авторов, у 70-75% больных различными формами гепатитных инфекций наблюдаются нарушения иммунологического статуса на различных уровнях (Арипходжаева Ф.А., 1999; Алиев Б.Р. с соавт., 2005).

Иммунный ответ на вирусный гепатит многообразен. Иммунные нарушения в основном отражают дефекты Т-клеточного звена иммунитета, как в количественном, так и в качественном составе Т-клеток. Так, нами выявлена низкая экспрессия CD3 - общего популяционного маркера Т-лимфоцитов у больных острым ВГВ. Достоверно низкая экспрессия молекул CD4 у обследованных нами больных свидетельствует о том, что при острой ВГВ - инфекции CD4+ Т-клеточный пролиферативный ответ на антигены HBV является достаточно слабым. Оказалось, что увеличение концентрации IL-1β и IL-8 в сыворотке больных обратно коррелирует с числом CD4+ -клеток. По всей видимости, в ингибировании экспрессии CD4+ - клеток при остром вирусном гепатите В определенную роль играют провоспалительные цитокины (Фрейдлин И.С., 1998).

У большинства больных, инфицированных HBV, ответ цитотоксических лимфоцитов является мультиспецифичным направленным как на структурные, так и неструктурные белки вируса.

Незначительное снижение экспрессии CD8+ Т- лимфоцитов больных острым ВГВ по сравнению с контрольной группой свидетельствует о том, что ответ ЦТЛ недостаточен для элиминации HBV. Сходные результаты получены и другими авторами (Бондаренко А.Л., 2001).

Предполагают существование нескольких путей индукции, экспансии и дифференцировки цитотоксических CD8+ Т-клеток. Один из них связан с действием АПК, способных обеспечивать достаточный стимул, чтобы активировать СD8+- клетки и заставить их вырабатывать IL-2 - аутокринный фактор, обуславливающий их дальнейшее развитие и пролиферацию. Моноциты, усиленно экспрессирующие CD95 у больных ВГВ, возможно, в свою очередь, подвержены апоптозу, что может вести к развитию дефицита АПК и ко-стимулирующих молекул, необходимых для активации CD8+ клеток.

Допускается, что CD4+ Т-клетки после стимуляции АПК синтезируют большое количество IL-2 (паракринный механизм), которым они обеспечивают умеренно стимулированные CD8+ - клетки. Активация CD8+ Т-клеток и по этому механизму недостаточно, что связано с низкой экспрессией CD4 и CD25 у исследованных нами больных ВГВ.

Нормальное функционирование иммунной системы строится на балансе Th1 и Th2, основанном на равноценной продукции ими регуляторных цитокинов. Полученные нами данные о низкой экспрессии CD25 (α-цепи рецептора IL-2) на лимфоцитах согласуются с предположением о нарушении равновесия в активации Th1 и Th2 типов по пути доминирования Тh1 при острой HBV-инфекции.

Молекула HLA-DR является поздним маркером активации и принадлежит к главному комплексу гистосовместимости II класса. Известно, что в периферической крови только 10% Т-лимфоцитов экспрессируют молекулу HLA-DR, но при активации клеток митогеном количество и плотность экспрессии этой молекулы резко возрастают. Хотя окончательная роль антигена HLA-DR на Т-лимфоцитах не совсем ясна, получены доказательства функционирования молекулы HLA-DR в качестве рецептора, включаемого трансдукцию сигнала активированными Т-лимфоцитами. В связи с этим можно предположить, что Т-лимфоциты HLA-DR могут выступать как профессиональные антигенпрезентирующие клетки, которые участвуют в поддержании иммунологической памяти. Так как клетки памяти относятся к короткоживущим (в отсутствие антигена), механизм поддержания пула клеток памяти, вероятно, осуществляется за счет HLA-DR.

В нашем исследовании выявлено снижение в количественном содержании Т-лимфоцитов, несущих на поверхности HLA-DR- маркер, отражающее степень угнетения иммунной системы, причем эти изменения коррелировали с клинико-лабораторной активностью ВГВ.

При изучении количества лимфоцитов с рецептором к апоптозу в периферической крови больных ВГВ было выявлено достоверное их повышение по сравнению с контрольной группой. В известной нам литературе было отмечено повышение скорости щелочной денатурации ДНК лизатов лимфоцитов периферической крови при ВГВ, что свидетельствует о накоплении повреждений в ДНК этих клеток. Полученные нами данные свидетельствуют, что в крови больных ВГВ с повышенным уровнем апоптоза мононуклеары, инфицированные вирусами гепатита, элиминируются из организма с помощью этого механизма. Необходимо отметить, что существует обратная зависимость между уровнем апоптоза лимфоцитов периферической крови и концентрацией АЛТ в крови больных ВГВ.

Цитотоксический иммунный ответ играет важную роль в защите организма от внутриклеточных патогенов, в том числе вирусов, и включает неспецифическое звено – NK-клетки. Активность NK-клеток опосредована секрецией макрофагами ИФН-α/β и особенно IL-12, который способен 100-кратно увеличить активность этих клеток. Реализация функций NK по отношению к клеткам-мишеням обусловлена экспрессией на их поверхности антигена CD16, который распознает Fc-порции иммуноглобулинов G3 и G1. Конечным результатом такого распознавания является антителозависимый клеточно-опосредованный цитолиз инфицированных клеток. Достоверно высокая экспрессия антигена CD16 на лимфоцитах у обследованных нами больных по сравнению с контролем может свидетельствовать о противовирусной резистентности макроорганизма, обусловленной NK-клетками. При остром гепатите В, вероятно, срабатывают механизмы активации NK-клеток.

Повышенная экспрессия CD20- общего популяционного рецептора В-лимфоцитов у больных ВГВ свидетельствует об активном участии В-лимфоцитов в противовирусном иммунном ответе. Но вместе с тем их протективная эффективность в условиях персистенции HBV-инфекции ограничена. Причиной «ускользания» от антител, несмотря на повышенную экспрессию CD20, вероятно является высокая мутационная изменчивость вирусного генома, при которой антитела не способны предотвратить инвазию вируса.

В фагоцитарной системе происходят как количественные, так и качественные изменения. Количественные изменения заключаются в понижении числа основных фагоцитирующих клеток: нейтрофилов и моноцитов. Качественные изменения заключаются в понижении способности фагоцитов захватывать, убивать и переваривать микроорганизмы. Помимо фагоцитоза, макрофаги выполняют одну важную функцию: они представляют чужеродную антигенную детерминанту в комплексе со своими HLA-DR антигенами Т- и В-лимфоцитам. С этого начинается развитие и клеточного, и гуморального иммунного ответа. При вирусном гепатите В нарушается эта функция моноцитов/макрофагов. Под воздействием инфекции происходит существенное уменьшение экспрессии HLA-DR и HLA-DQ антигенов на этих клетках, следствием чего является пониженная способность организма развивать специфический иммунный ответ.

Характер гуморального иммунитета заключается в разнонаправленном изменении уровня основных классов иммуноглобулинов G, A, M - очень важных в борьбе с инфекционными агентами. Ранее других в процессе иммунного ответа начинает секретироваться IgM. Эти антитела обладают высокой способностью связывать комплемент, агглютинировать и лизировать клетки - мишени. Они считаются антителами экстренной иммунной защиты, предохраняющими организм от бактериемии.

Кроме того, нельзя не учитывать и того факта, что при гепатите В происходит блокировка интерферонпродуцирующей активности лейкоцитов, являющейся одним из моментов хронизации инфекционного процесса.

Известно, что наиболее частым типом нарушения интерферонового статуса в острой стадии различных заболеваний является глубокое подавление ИФН-продуцирующей способности иммуноцитов и повышение титров циркулирующего в крови ИФН (Шилова И.В. с соавт., 2003). Аналогичная закономерность отмечена и в наших наблюдениях у лиц с маркерами остро протекающего гепатита В. Наши данные совпадают с результатами ранее проведенных исследований, свидетельствующих о том, что у больных гепатитом В в разгар заболевания показатели системы ИФН характеризовались резким угнетением способности клеток in vitro к продукции α – и γ- ИФН (Новичкин В.В. соавт., 2004).

Очевидно, что иммунокорригирующая терапия и элиминация вирусов из организма являются патогенетически обоснованными направлениями в лечении вирусного гепатита В и в этом плане нам было интересно изучить действие препарата «Виусид».

В пятой главе приводятся данные по оценке состояния иммунной системе у больных ВГВ в динамке базисного лечения и комплексного, с включением «Виусида». Наблюдение проводили в сроках: через месяц, через 3 и 6 месяцев после применения «Виусида».

Установлено, что базисная терапия больных ВГВ практически не способставала нормализации изученных параметров иммунной системы.

Анализ клинической и иммунокоррегирующей эффективности при использовании «Виусида» в комплексном лечении показал отчетливое иммуностимулирующее действие, связанное с активацией клеток моноцитарно-макрофагальной системы. Следствием активации клеток этой системы является повышение функциональной активности практически всех звеньев защиты организма от инфекции:

- факторов естественной резистентности: нейтрофилов, моноцитов, макрофагов, NK-клеток;

  • факторов гуморального и клеточного иммунитета.

Активация клеток моноцитарно-макрофагальной системы ведет к повышению миграции нейтрофилов в воспалительный очаг. Наши результаты согласуются с литературными данными. Параллельно с этим происходит и активация клеточного иммунитета. Повышенная способность естественных киллеров и антигенспецифических Т-киллеров убивать клетки, зараженные внутриклеточными вирусами. Детоксицирующее действие связано с особенностями структуры «Виусида». Как уже отмечалось, в его составе имеется большое количество активных группировок. В силу этого «Виусид» обладает способностью сорбировать на своей поверхности различные токсические вещества, в том числе вирусной природы, и тем самым усиливать их элиминацию из организма.

Таким образом, «Виусид», несомненно, можно рекомендовать больным вирусным гепатитом В, у которых наблюдается вторичное иммунодефицитное состояние в качестве иммунокорректора.


ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Выводы

  1. Под воздействием «Виусида» первичный иммунный ответ к эритроцитам барана у мышей повышается в 2,5 раза, а у крыс – в 3,1 раза.

  2. «Виусид» корригирует вторичный иммунодефицит при остром токсическом гепатите, иммунодепрессии, вызванном имураном, гемолитической анемии и голодании.

  3. «Виусид» в системе in vitro существенно повышает функциональную активность иммуноцитов животных с вторичными иммунодефицитами.

  4. «Виусид» обладает свойством в 2,6 раза повышать пролиферацию кроветворных стволовых клеток.

  5. Вирусный гепатит В сопровождается значительными изменениями в иммунной системе, выражающимися в клеточном звене иммунитета - низким содержанием CD3+-, CD4+-,CD8+-лимфоцитов в периферической крови и разнонаправленным характером содержания лимфоцитов с активационными маркерами - количество СD25+-клетки снижено, CDHLA-DR+- и CD95+ клеток - повышено. В гуморальном звене иммунитета отмечается повышение содержания В-лимфоцитов и уровня IgM, снижение концентрации IgG и IgA. Состояние неспецифических факторов защиты характеризуется снижением фагоцитоза, повышением уровня ЦИК и количества NK-клеток. Наблюдается повышение уровня цитокинов ИЛ-1ß, ИЛ-8 и снижение ИНФ-γ.

  6. При общепринятом симптоматическом лечении вирусного гепатита В, не смотря на улучшение клинического состояния, показатели иммунного статуса больных не претерпевают значительных изменений, тогда как включение «Виусида» в комплекс симптоматического лечения способствует существенному улучшению нарушенных функций иммунной системы.


Практические рекомендации


1.Всем больным вирусным гепатитом В рекомендуется проводить исследование на состояние иммунной системы, включающее в себя определение клеточного, гуморального и цитокиного статуса.

2.В комплексное лечение больных вирусным гепатитом В рекомендуется включать «Виусид» в дозировке по 7 гр. 3 раза в день в течение 30 дней, в следующие 30 дней - по 7 гр. два раза в день и начиная с третьего месяца лечения до шести месяцев - по 7 гр. 1 раз в день.


СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ


1. Бакиева М.К. Иммунокоррегирующая эффективность Виусида у больных с вирусными гепатитами //Тез. докл. конф. молодых ученых.- Журнал теоретической и клинической медицины. - 2001. - №3. - С. 124.

2. Рузыбакиев Р.М., Мусаходжаева Д.А., Бакиева М.К., Каримова Ш.М. Оценка состояния иммунного статуса в динамике лечения Виусидом больных острым вирусным гепатитом В //Тез. докл. участников симпозиума, посвященного результатам научных исследований препарата Виусид институтами Минздрава РУз.- Ташкент. - 2001.- С. 9-11.

3. Рузыбакиев Р.М., Ахмедова Л.Д., Хегай Т.Р., Григорьянц К.Э., Бакиева М.К. Динамика выявляемости ДНК вируса гепатита В у больных вирусным гепатитом В после приема препарата VIUSID //Тез. докл. участников симпозиума, посвященного результатам научных исследований препарата Виусид институтами Минздрава РУз.- Ташкент. - 2001.- С. 11-12.

4. Бакиева М.К., Батырбеков А.А. Влияние «Виусида» на иммуногенез у разных видов животных //Проблемы биологии и медицины (Самарканд).- 2002. - №2. - С. 36-39.

5. Бакиева М.К., Мусаходжаева Д.А., Хегай Т.Р., Нишанова Г.Э. Динамика иммунологических показателей у больных острым вирусным гепатитом В в результате проведенной иммунокоррекции //Тез. Республ. науч. конф. «Актуальные вопросы аллергологии и иммунологии», Ташкент, 2003. - Журнал теоретической и клинической медицины. - 2003. - №3. - С. 18.

6. Бакиева М.К. Динамика иммунологических параметров больных вирусным гепатитом В при лечении Виусидом //Журнал теоретической и клинической медицины. - 2007. - №2. - С. 73-76.

7. Арипова Т.У., Бакиева М.К., Батырбеков А.А. Экспериментально-клиническое обоснование применения препарата «Виусид» в качестве иммунокорректора при вторичных иммунодефицитах - Методические рекомендации. - Ташкент, 2008. - 20 с.

Тиббиёт фанлари номзоди илмий даражасига талабгор

М.К. Бакиеванинг 14.00.36 - аллергология ва иммунология ихтисослиги бўйича «Клиникада ва тажрибада «Виусид» препаратининг иккиламчи иммунотанқислигидаги иммуномодулловчи самарасининг механизмлари» мавзусидаги диссертациясининг


РЕЗЮМЕСИ

Калитли сўзлар: иккиламчи иммунотанқисликлар, жигар, иммунитет аъзолари, иммунитет коррекцияси.

Тадқиқот объектлари: талоқ, тимус, лимфа тугунлар, суяк кўмиги, қон, жигар.

Ишнинг мақсади: клиникада иммун системани сусайиши билан давом этадиган патологик ҳолатларда ва тажрибада иккиламчи иммунотанқислик ҳолларида Виусид препаратининг иммунотроп хусусиятларини баҳолаш.

Текшириш усуллари: иммун статусни баҳолашни тажрибавий ва клиник усуллари.

Олинган натижалар ва уларнинг янгилиги: «Виусид» препаратини тажрибавий ҳайвонларнинг иммунологик жараёнларига, ҳамда одамнинг иммунтанқислик ҳолатларидаги иммунокомпетент ҳужайраларининг вазифаларига таъсирини ўрганиш.

Маълум бўлишича, «Виусид» интакт сичқон ва каламушларда қўй эритроцитларига бўлган иммун жавобни 2,5-3,1 баробар оширади. «Виусид» иккиламчи иммунотанқисликли ҳайвонларда, яъни: ўткир токсик гепатит, имуран билан чақирилган иммунодепрессия, гемолитик анемия ҳамда in vivo ва in vitro тизимда оч қолишда антитанагенезни ошириш хусусиятига эга. Аниқланишича, «Виусид» қон ҳосил қилувчи устунсимон ҳужайраларининг пролифератив фаоллигини бир неча баробар оширади.

Маълум бўлишича, «Виусид» ўткир вирусли гепатит В бўлган касалларда ҳужайралараро омилларининг ўзаро таъсирини-IL-1, IL-8, INF- ишлаб чиқариш даражасини нормаллаштиради, Т-лимфоцитлар (CD3), Т-хелперлариндукторлар (CD4), апоптозга бўлган рецептори бор лимфоцитлар (CD95), фаоллаштирилган лимфоцитлар (CDHLA DR) миқдорини оширади, табиий киллерлар (CD16)-лимфоцитлар миқдорини эса камайтиради.

Амалий аҳамияти: «Виусид»нинг аниқланган иммунобиологик хусусиятлари уни иммун системаси зарарланган беморларни даволашда ёрдам беради. Амалиётда аниқланишича, «Виусид»ни иммунитетни коррекция қилиш хусусияти муҳим аҳамиятга эга, яъни у функционал фаоллиги пасайган ҳужайраларга танлаб таъсир кўрсатади.

Татбиқ этиш даражаси ва иқтисодий самарадорлиги: Олинган натижалар вирусли гепатит В билан оғриган беморларни даволаш учун клиник амалиётга киритилган.

Татбиқ этиш соҳаси: тиббиёт.

РЕЗЮМЕ

диссертации Бакиевой М.К. на тему: «Механизмы иммуномодулирующего эффекта препарата «Виусид» при вторичной иммунной недостаточности в клинике и в эксперименте» на соискание ученой степени кандидата медицинских наук по специальности 14.00.36 - аллергология и иммунология


Ключевые слова: вторичные иммунодефициты, печень, органы иммунитета, коррекция иммунитета.

Объекты исследования: селезенка, тимус, лимфоузлы, костный мозг, кровь, печень.

Цель работы: Оценка иммунотропных свойств препарата «Виусид» в условиях вторичной иммунологической недостаточности в эксперименте и при патологическом состоянии, сопровождающимся снижением функции иммунной системы в клинике.

Методы исследования: экспериментальные и клинические методы оценки иммунного статуса.

Полученные результаты и их новизна: Изучено воздействие препарата «Виусид» на иммунологические процессы, у экспериментальных животных, а на функции иммунокомпетентных клеток человека в условиях иммунодефицитных состояний.

Установлено, что «Виусид» в 2,5-3,1 раза повышает иммунный ответ к эритроцитам барана у интактных мышей и крыс. «Виусид» обладает способностью существенно повышать антителогенез у животных с вторичными иммунодефицитами: острый токсический гепатит, иммунодепрессия, вызванная имураном, гемолитическая анемия и голодание в системе in vivo и in vitro. Обнаружено, что «Виусид» в несколько раз усиливает пролиферативную активность кроветворных стволовых клеток.

Установлено, что у больных с острым вирусным гепатитом В «Виусид» способствует нормализации уровня продукции факторов межклеточного взаимодействия – IL-1β, IL-8, INF-γ и повышению содержания Т-лимфоцитов (CD3+), Т-хелперов/индукторов (CD4+), лимфоцитов с рецептором к апоптозу (CD95+), активированных лимфоцитов (CDHLA DR+) - и снижению количества натуральных киллеров (CD16+)-лимфоцитов.

Практическая значимость работы: Обнаруженные иммунобиологические свойства «Виусида» позволяют использовать его в терапии больных, у которых имеют место повреждение иммунной системы. Ценным с практической точки зрения является проявление иммунокоррегирующих свойств «Виусида» непосредственно в условиях угнетения деятельности иммунокомпетентных элементов крови, т.е. избирательное действие на клетки с пониженной функциональной активностью.

Степень внедрения и экономическая эффективность: Результаты внедрены в клиническую практику лечения больных вирусным гепатитом В.

Область применения: медицина.

RESUME

Thesis of Bakieva M.K. on the academic degree competition of the candidate of medical sciences, specialty 14.00.36 – allergology and immunology: “Mechanisms of immunomodulation effect of preparation «Viusid» on secondary immune deficits in the clinic and in the experiment”


Key words: secondary immune deficits, liver, organs of immunity, correction of immunity.

Objects of research: spleen, thymus, lymph nodes, bone marrow, blood, and liver.

Purpose of research: Appreciation immunotrop properties of preparation «Viusid» in condition secondary immune deficits in experiment and on pathologic condition, which accompanied by decrease function of immune system in clinic.

Methods of research: experimental and clinic methods of appreciation immune status.

Results obtained and their novelty: Studied influence of preparation «Viusid» to immunological processes in experimental animals, and to function of immunecompetents cells of human body on condition immune deficits conditions.

It was established, that «Viusid» increase immune answer to erythrocytes of sheep in intact mouse and rats in 2,5-3,1 time. The «Viusid» have ability increase antibody genesis in animals with secondary immune deficits acute toxic hepatitis, immnedepretion, which called by imuran, hemolytic anemia and starvation in system in vivo and in vitro. It was displayed, that the «Viusid» increase proliferative activity of hemopoesis cell in again time.

It was established, that in patients with acute viral hepatitis B the «Viusid» contribute to normalization level of production factors incellular interaction - IL-1, IL-8, INF- increase content T-lymphocytes (CD3+), T-helpersinductors (CD4+), lymphocytes with receptors to apoptosis (CD95+), activity lymphocytes (CDHLA DR+)- and decrease amount natural killers (CD16+)- lymphocytes.

Practical value of research: The discovering immunbiological property of «Viusid» permit to use it in therapy patients, which have damaging of immune system. In practice the valuable display of «Viusid» is immunocorrection property in condition decrease work of immunocompetent elements of blood, that is to say election action to cells with decrease functional activity.

Implementation degree and economic effectiveness: Results are introduce into clinic practical therapy patients with viral hepatitis B.

Sphere of usage: medicine.


Соискатель__________________________


Добавить документ в свой блог или на сайт
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:

Похожие:

Удк: 616-017. 1: 616. 33/34-085 iconРекомендации удк 619: 616. 9-085: 579. 852. 13Н эффективность препаратов при некробактериозе животных // Молочное и мясное скотоводство. 2006. №4. С. 39-41

Удк: 616-017. 1: 616. 33/34-085 iconМетодические рекомендации москва 2007 удк: 616. 12-005. 4-084-085. 273. 53. Ббк противотромбоцитарная терапия в клинической практике: Методические рекомендации. М. Гоувпо «мма им. И. М. Сеченова», М. Гоу впо «мгмсу росздрава», 2007

Удк: 616-017. 1: 616. 33/34-085 iconУдк: 616-018. 2-007. 17: 575

Удк: 616-017. 1: 616. 33/34-085 iconУдк 619: 616. 981. 55: 636. 2

Удк: 616-017. 1: 616. 33/34-085 iconУдк 616. 083. 98: 615. 11 Ббк 53. 5-55. 14 Б74

Удк: 616-017. 1: 616. 33/34-085 iconУчебное пособие Благовещенск 2010 удк 616 092. 19 053

Удк: 616-017. 1: 616. 33/34-085 iconУчебно-методическое пособие Нальчик, 2003 удк 616 (97+5) ббк 55. 81

Удк: 616-017. 1: 616. 33/34-085 iconУчебно-методическое пособие минск 2006 г. Удк 616-053. 2/. 6-084-08(075. 8)

Удк: 616-017. 1: 616. 33/34-085 iconУчебно-методическое пособие Минск 2004 удк 616. 314. 13-008. 8(075. 8)

Удк: 616-017. 1: 616. 33/34-085 iconУчебно-методическое пособие Минск 2004 удк 616. 34-022-036. 22 (075. 8)

Поместите кнопку у себя на сайте:
Образование


База данных защищена авторским правом ©cow-leech 2000-2013
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
COW-LEECH.RU