Фармако-токсикологическая характеристика энтерина 06. 02. 03 ветеринарная фармакология с токсикологией icon

Фармако-токсикологическая характеристика энтерина 06. 02. 03 ветеринарная фармакология с токсикологией





Скачать 296.12 Kb.
НазваниеФармако-токсикологическая характеристика энтерина 06. 02. 03 ветеринарная фармакология с токсикологией
ВЛАСОВА ЛИДИЯ МИХАЙЛОВНА
Дата конвертации16.06.2013
Размер296.12 Kb.
ТипАвтореферат диссертации
На правах рукописи


ВЛАСОВА ЛИДИЯ МИХАЙЛОВНА


ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

ЭНТЕРИНА


06.02.03 – ветеринарная фармакология с токсикологией


Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук


Санкт-Петербург

2010


Работа выполнена на кафедре фармакологии и токсикологии ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины».


Научный руководитель:

заслуженный деятель науки Российской Федерации,

доктор ветеринарных наук, профессор Соколов Владимир Дмитриевич


Официальные оппоненты:

Доктор ветеринарных наук, профессор Щербаков Григорий Гаврилович

Доктор ветеринарных наук, профессор Слободяник Виктор Иванович


Ведущая организация:

ФГОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия»


Защита состоится « » мая 2010 года в часов на заседании диссертационного совета Д 220.059.03 при ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины» по адресу: 196084, Санкт-Петербург, ул. Черниговская, 5.

тел./факс (812) 388-36-31.


С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины»


Автореферат разослан « » апреля 2010 года и размещён на сайте http://spbgavm.ru « » апреля 2010 г.


Ученый секретарь

диссертационного совета Л.М. Белова


1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ


Актуальность темы. Болезни органов пищеварения у молодняка с.-х. животных превалируют над всеми другими патологиями и до сих пор являются проблемой животноводства. Так, у телят молочного периода они составляют до 85% от других болезней и во многих хозяйствах поражают от 60 до 100% нарождающегося молодняка (Аликаев В.А.,1974; Ежов А.А.,1974; Щербаков Г.Г.,1979; Щербаков Г.Г., Коробов А.В. 2002; Волков Г.К.,2003; Фогель Л.С., 2004 и др.)

Причин и предрасполагающих факторов в развитии и течении желудочно-кишечных болезней, к которым относится и диарея, у молодняка с.-х. животных и, прежде всего, у телят и поросят раннего возраста чрезвычайно много, однако можно выделить и некоторые основные. Это – микробный фактор, ослабленное состояние организма молодняка, полученных от коров и свиноматок-матерей с различными нарушениями обмена веществ, в том числе и их иммунодефицитное состояние организма и несоблюдение ветеринарно-санитарных правил при выращивании молодняка (Анохин Б.М., 1980; Урбан В.П., 1981; Сидоров В.Т., 1984; Самохин В.Т. и соавт., 1988; Придыбайло Н.Д., 1991; Соколов В.Д. и соавт., 1992, Захаров П.Г., 1998; Волков Г.К.,2000). Поэтому в патогенезе диарей, как правило, имеются явления дисбактериоза, иммунодефицитное состояние организма, токсикоз, нарушение мембранного пищеварения, расстройство всасывания и переваривания молозива (Щербаков Г.Г., Старченков С.В., 2004). Как следствие усиливается перистальтика, возникает обезвоживание и общий токсикоз организма. В этой связи применяемые средства для лечения и купирования диарей у телят должны исправлять и корректировать, если не все, то большинство вышеперечисленные патологические мишени (Ноздрин Г.А., 1992: Соколов В.Д., 1994, 1995).

Поэтому не случайно, что для лечения и профилактики диарей у молодняка с.-х. животных применяются разнообразные лекарственные средства – антибиотики, нитрофураны, иммуностимуляторы, вяжущие и регидратационные средства, пробиотики, пребиотики и многие др. (Божко В.И.,1972; Аликаев В.А.,1974; Карпуть И.М. и соавт.,1983; Подкопаев В.И.,1983; Яшин А.В.1985,1997; Кондрахин И.П.,1989; Данченко Л.К.,1990; Анохин.Б.М., 1996; Щербаков Г.Г., Коробов А.В.,2003;.Мухина Н.В.,2004).

Следует отметить, что хотя антимикробные химиопрепараты и не утратили значения при лечении диарей у молодняка животных, тем не менее, из-за их негативного влияния на организм человека и животных в последнее время в мировой практике и у нас в стране нарастает тенденция изыскания эффективных альтернативных средств, менее опасных для человека, животных и окружающей среды (Андреева Н.Л., 2008; Соколов В.Д., 2008; Соколов В.Д., Андреева Н.Л., 2008; Фогель Л.С., 2008). Вот почему в последнее время для борьбы с диареями стали широко применять пробиотики (Панин А.Н., Малик Н.И.,2006, Ноздрин Г.А. и соавт., 2008, Денисов Г.В., 2009). Однако, как указывает А.С. Овод (2003) и др. исследователи, при назначении пробиотиков из-за целого ряда причин лечение не всегда бывает эффективным.

Достаточно эффективными при диарее новорожденных телят оказались два препарата – лерс ( ВГНКИ) и диарин ( СПбГАВМ). Из этих средств диарин длительное время широко применялся в хозяйствах Ленобласти и других областей РФ, а также в Республике Беларусь (Соколов В.Д. и соавт., 1999). Однако, подорожание одного из компонентов препарата - диоксидина, значительно ограничило его использование в ветеринарии В то же время лерс, несмотря на свою эффективность технологически не совсем удобен для применения (расфасован в двух пакетах, которые перед применением необходимо растворять и смешивать), что требует больше затрат рабочего времени.

В этой связи, разработка нового, эффективного, экологически безопасного и не дорогого лекарственного средства весьма актуальна и отвечает запросам животноводства.

Изложенное и послужило основанием для разработки и испытания нового антидиарейного средства.

Цель и задачи исследования. Целью исследования явилась разработка нового антидиарейного препарата для новорожденных телят – энтерина. Который по эффективности приближался бы к диарину и оказался бы дешевле последнего.

Для этого были поставлены следующие задачи:

  1. Разработать рецептуру энтерина, подобрав необходимые компоненты.

  2. Изучить фармакологические и токсикологические свойства энтерина на лабораторных животных.

  3. Определить оптимальные лечебно-профилактические дозы энтерина и выяснить его безвредность для новорожденных телят.

  4. Провести производственные испытания препарат.

  5. Разработать рекомендации по применению энтерина в ветеринарии.

Научная новизна работы. Впервые разработано новое антидиарейное средство – энтерин. Изучены фармакологические и токсикологические свойства препарата и установлен высокий лечебно-профилактический эффект при диареях новорожденных телят, который по эффективности приближается к диарину, однако дешевле и несколько экологичнее последнего.

Практическая значимость работы. Впервые отработаны оптимальные профилактические и лечебные дозы энтерина, выяснена его безвредность для телят, проведены производственные испытания и разработаны рекомендации по его применению в ветеринарии.

Ценным качеством нового антидиарейного средства является невысокая стоимость и экологичность его ингредиентов при достаточно высокой эффективности.

Основные положения, выносимые на защиту. Материалы по разработке и изучению фармакологических и возможных токсических свойств энтерина и рекомендации по его применению в ветеринарии.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на :

ХVIII и ХIХ Международных межвузовских научно-практических конференциях: «Новые фармакологические средства в ветеринарии», Санкт-Петербург, 2006, 2007; первом международном конгрессе ветеринарных фармакологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства», Санкт-Петербург, 2008; семинаре-презентации: «Перспективы и преимущества применения ветеринарных препаратов и пищевых добавок на основе молочной кислоты» (Санкт-Петербург, 2008)., Всероссийском съезде ветеринарных фармакологов и токсикологов «Эффективные и безопасные лекарственные средства в ветеринарии», Санкт-Петербург, 2009.

Публикации. Основные положения диссертации опубликованы в 9 научных работах, в том числе в одном из журналов, входящим в список ВАК.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, результатов собственного исследования, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения.

Объём диссертации 130 страниц. Список литературы включает 211 источников, в том числе 26 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 6 рисунками и 30 таблицами.


2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ


2.1. Материалы и методы исследования

Исследования провели в течение 2005-2009 г.г. на кафедре фармакологии и токсикологии Санкт-Петербургской Госветакадемии, и в двух животноводческих хозяйствах Волосовского района, Ленинградской области, содержащих коров и телят. Для этого использовали существующие методы исследований: фармакологические, токсикологические, эпизоотологические, бактериологические, клинические, гематологические, морфологические, иммунологические.

Экспериментальные исследования провели на 105 белых мышах и 145 белых крысах, а также на новорожденных телятах суточного возраста.

Производственные опыты по испытанию энтерина провели на товарных животноводческих фермах ЗАО «Ущевицы» и ОАО «Остроговицы» Ленинградской области на 1151 новорожденных телятах.

Бактериологическому исследованию подвергли 35 проб фекалий от телят с разной тяжестью течения диарей и в разные сроки развития болезни.

Изоляцию культур микроорганизмов из фекалий проводили на мясопептонном бульоне или агаре и среде Эндо, Выделяемые культуры идентифицировали по морфологическим, культуральным, биохимическим, серологическим и патогенным для белых мышей свойствам, используя определители микробов Р.А. Циона (1948), D. Bergey (1974).

Чувствительность выделенных культур к антимикробным препаратам in vitro определяли методом серийных разведений. В организме белых крыс эффективность энтерина сравнивали с диарином и антибиотиком тетрациклином (на модели экспериментального колибактериоза а также изучали методом  В.М Земского и соавторов (1977), основанном на определении иммунологической защиты организма (устойчивости тканей различных органов к обсеменению кишечной палочки),

Определение токсичности энтерина провели согласно существующим нормативным документам по определению токсичности лекарственных средств по тестам, изложенным в инструкции по проведению ветеринарно-токсикологических исследований стимуляторов роста сельскохозяйственных животных и гигиенической оценки продуктов животноводства (1985), а также в методических указаниях по определению токсичных свойств препаратов, Исследования провели на белых мышах, белых крысах, изучив острую и подострую токсичность препарата и некоторые иммунобиологические и гематологические показатели крови лабораторных животных, а также в локальных опытах на телятах, на которых была изучена острая и субхроническая токсичность.

При изучении позитивного влияния энтерина на организм лабораторных животных учитывали некоторые иммунобиологические показатели подопытных и лабораторных животных, адаптогенное и ростостимулирующее действие.

Гематологические показатели определяли общепринятыми методами в пробах крови.

Количество общего белка в сыворотке крови определяли рефрактометрическим методом. В основе метода (рефрактометрии) лежит способность сред различно преломлять проходящие через них лучи света.

Концентрацию глюкозы определяли орто-толуидиновым методом, основанном на окрашивании соединения глюкозы орто-толуидином в растворе уксусной кислоты, интенсивность которого пропорциональна концентрации глюкозы.

Активность лизоцима устанавливали фотоэлектроколометрическим методом по А.Г. Дорофейчуку (1968), основанном на измерении оптической плотности среды в результате способности лизоцима сыворотки крови лизировать тест-культуру M. lysodiecticus в фосфатном буфере.

Определение бактерицидной активности сыворотки крови (БАС) проводили методом, описанным О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1966). Принцип основан на измерении оптической плотности мясопептонного бульона при росте в нем кишечной палочки с добавлением и без добавления испытуемой сыворотки.

Содержание иммуноглобулина G в сыворотке крови определяли по методу Манчини (1965) в модификации Л.С. Колабской и соавт. (1975). Метод заключается в образовании кольца преципитации в результате взаимодействия смеси агара с антисывороткой к иммуноглобулину и антигена исследуемой сыворотки, внесенной в лунки агаровой пластинки.

Интенсивность фагоцитоза устанавливали по фагоцитарному индексу, который определяли средним числом фагоцитированных микробов, приходящихся на один активный нейтрофил.

Цифровые данные подвергнуты статистической обработке. Различия между относительными величинами оценивали с помощью критерия Стьюдента, рассчитанного по формуле относительных величин.


2.2. Хозяйственная и эпизоотологическая характеристика ОАО «Остроговицы» и ЗАО «Ущевицы»


Болезни органов пищеварения у молодняка сельскохозяйственных животных, в том числе у телят, до сих пор встречаются во многих животноводческих хозяйствах, поражая более половины нарождающихся телят (Соколов В.Д., 1962; Аликаев В.А., 1974; Щербаков Г.Г., 1979; Яшин А.В., 1985; Урбан В.П., 1984; Фогель Л.С., 2004 и другие). Анализируя эпизоотологические данные двух животноводческих хозяйств Ленинградской области, Волосовского района – ЗАО «Ущевицы» и ОАО « Остроговицы» мы установили, что большинство нарождающихся телят в этих хозяйствах с первых же дней страдают диареями. Например, в 2007-2008 г.г. этот показатель по обоим хозяйствам составил более 80%.

Выясняя причины возникновения такого количества диарей у новорожденных телят, и анализируя литературные данные по этому вопросу, установили, что у коров- матерей во время стельности в крови снижается содержание каротина и общего белка, в том числе гаммаглобулинов, ответственных за иммунологическое состояние организма. Например, при физиологической норме каротина в зимний период от 4 до 7 г%. мы регистрировали в крови коров лишь 1,3 ± 0,06 г% а у отдельных животных менее 0,5 г%. Таким образом, одной из причин проявления диарей у новорожденных телят можно считать авитаминозные и иммунодефицитные состояния организма. Эти негативные процессы одновременно усугубляется высокой молочной продуктивностью коров (более 8000 кг). Подобное положение подтверждается многими исследователями (Аликаев В.А.,1974; Анохин В.М.,1980; Урбан В.П.,1981; Карпуть И.М. и соавт., 1983; Ноздрин Г.А., 1991; Апатенко В.М., 1992 и др.).

Одновременно с этим у больных диареей телят снижалась интенсивность фагоцитоза (по фагоцитарному индексу, табл.1) и наблюдалась тенденция уменьшения бактерицидной активности сыворотки крови и IgG. Одновременно с этим в крови больных телят.

Таблица 1

Иммунологические показатели здоровых

и больных диареей телят (M±m)

Группы животных

Лизоцим, %

БАС, %

Ig G, г/л

Фагоцитарный индекс

Здоровые

20,7 ± 1,3

23,4 ± 1,2

13,1 ± 0,7

6,7 ± 0,4*

Больные

21,4 ± 1,7

22,5 ± 1,7

12,3 ± 0,8

5,1 ±0,3



При определении гематологических показателей констатировали, что количество форменных элементов крови у больных и здоровых телят было почти одинаковым. Наблюдалось тенденция некоторого увеличения количества эритроцитов у больных телят и замедление СОЭ. Что можно объяснить обезвоживанием организма («сгущение крови»).

Таблица 2

Гематологические и некоторые биохимические показатели крови

здоровых, больных диареей и леченных энтерином телят (M±m)



Показатели

Группы телят

здоровые

больные

после лечения

Эритроциты,х1012

6,5 ± 0,3

7,1 ± 0,3

6,7 ± 0,2

Лейкоциты, х 109

8,9 ± 0,4

12,4 ± 0,4*

9,8 ± 0,3

Гемоглобин, г/л

109 ± 6,3

115 ± 5,7

107 ± 7,1

Общий белок г/л

71,0 ± 3,1

65 ± 3,7

68 ± 3,1

СОЭ, через 1 ч

0,8 ± 0,03

1,2 ± 0,09

0,9 ± 0,03

Глюкоза, ммоль/л

4,9 ± 0,2

5,8 ± 0,2

5,3 ± 0,1


По мнению многих авторов (Захаров П.Г.,1998; Волков Г.К.,2000 и др.) на возникновение диарей у телят влияет человеческий фактор (неудовлетворительная работа и халатность животноводов: телятниц, доярок, скотников). В этом мы могли убедиться сами при изучении профилактической эффективности энтерина у новорожденных телят. В одном из опытов при назначении препарата мы тщательно следили за соблюдением зоогигиенических правил при выращивании телят с момента их рождения, подключив к этому контролю зооветспециалистов и бригадиров. В этом опыте профилактическая эффективность энтерина и диарина составила 96%, тогда как в целом по двум хозяйствам (когда не было такого тщательного контроля) она была около 90%.

Видимо из-за полиэтиологичности данной патологии, трудно подобрать эффективные лекарственные средства для ее профилактики и лечения. Вот почему в этих целях используется большое количество препаратов разных фармакологических групп. При этом на первое место пока выходят антибиотики, хотя имеются более эффективные комплексные препараты, например лерс, разработанный в ВГНКИ ветпрепаратов и диарин, разработанный в ООО «НИИВФ Эврика). Однако лерс не совсем удобен технологически для применения, комплексный метод терапии с использованием многих препаратов, в основном приемлем для лечения тяжелых, токсических диарей, а производство диарина резко сократилось из-за резкого повышения стоимости одного из ингредиентов – диоксидина.


2.3. Разработка нового антидиарейного средства энтерин


Учитывая выше изложенное, перед нами была поставлена цель – разработать новый антидиарейный препарат, который бы по эффективности не уступал диарину, но был дешевле его. Таким лекарственным средством стал комплексный препарат энтерин, разработанный в ООО «НИИВФ Эврика» при нашем участии.

При создании энтерина было учтено большинство из этих этиопа-тологических факторов, взяты лекарственные вещества, воздействующие на основные мишени патологического процесса, проявляющие местное и резорбтивное действие. При этом диоксидин был заменен натрия хлоридом, а все остальные компоненты диарина остались аналогичными и в таком же составе.

Гипертонические растворы натрия хлорида (3-5-10%) концентрации проявляют антимикробное, противовоспалительное, очищающее раны от слизи и гноя действием, воздействуют на патогенную и условно-патогенную микрофлору кишечника, благодаря чему способствуют нормализации микробного пейзажа. Препарат издавна применяется в ветеринарии наружно (для лечения ран) и внутрь (при воспалении слизистых оболочек кишечника). По данным П.Д.Евдокимова (1970) натрия хлорид при внутреннем применении раздражает рецепторы, усиливает секрецию слюнных и желудочно-кишечных желез, активирует перистальтику, а также усиливает всасывание питательных веществ, повышает аппетит и улучшает процессы пищеварения. В гипертонических растворах действует антисептически, противокатарально, противобродильно и противогнилостно. Внутрь назначают для улучшения аппетита и нормализации процессов пищеварения.

По сообщению И.Е.Мозгова (1985) при воспалении слизистых оболочек натрия хлорид в изотонических или слабогипертонических растворах разжижает (растворяет) слизь, улучшает рассасывание продуктов воспаления и ускоряет заживление. Кроме того, он незначительно усиливает перистальтику и повышает всасываемость питательных веществ в кишечнике

Таким образом, энтерин представляет собой жидкость, состоящую из молочной кислоты (антимикробное, противовоспалительное и нормализующее процессы пищеварения действие), метилурацила (адаптогенное, иммуностимулирующее действие) и натрия хлорида.

Вначале определяли фармацевтическую совместимость ингредиентов. В этих целях препараты, согласно рецептуре растворяли в дистиллированной воде, смешанной с 40% молочной кислотой в соотношении 6:1. Установили, что все препараты хорошо растворялись в этой смеси, образуя истинный раствор светло-соломенного или соломенного цвета, в зависимости от цвета молочной кислоты, без каких-либо осадков и помутнения.

Фармакологическую совместимость компонентов определяли косвенно, при выяснении возможного побочного действия. В этих целях, после определения условно-оптимальной дозы (за основу была взята доза диарина – 0,3 мл/кг) группам лабораторных животных задавали комплексный препарат и отдельные компоненты, входящие в состав энтерина.

Установили, что как по отдельности, так и в целом ингредиенты не проявляли регистрируемых нежелательных эффектов на организм лабораторных животных (белые мыши и крысы)


2.4. Изучение антимикробного действия энтерина


При изучении антимикробного действия энтерина выяснили, что препарат в концентрации 0,5% ингибирует рост кишечной палочки, следовательно, проявляет антимикробный эффект. Это подтвердилось и при экспериментальном колибактериозе белых мышей и белых крыс. Препарат в дозе 0,3 мл/кг проявлял профилактическое (75%, в зараженном контроле заболели все мыши) и лечебное действие (85%, в зараженном контроле 45%). При экспериментальном колибактериозе белых крыс лечебная и профилактическая эффективность энтерина составила 50%. Антимикробное действие подтвердилось и в опыте по методике В.М. Земского и соавт.(1977) Авторы установили, что иммуностимулятор РНК повышает устойчивость различных тканей внутренних органов белых мышей, к эшерихиям. Аналогичный опыт мы провели на белых крысах, которым за 7 дней до заражения назначали энтерин 2 раза в день, в дозе 0,3 мл/кг.

Оказалось, что содержание эшерихий в органах и тканях контрольных белых крыс (кровь, печень, селезенка, почки) было примерно одинаковым и составляло 900-1000 КОЕ в 1 мг. У подопытных крыс содержание эшерихий в указанных органах было в половину меньше и колебалось в пределах 450-530 КОЕ. Полученные данные кроме В.М.Земского и соавт., согласуются с результатами опытов Н.Л.Андреевой (1992). Данный опыт подтверждал не только иммуностимулирующее действие энтерина, но и его антимикробную активность.


2.5. Адаптогенные свойства энтерина


Адаптогенные свойства энтерина выяснили в опыте при стрессировании белых крыс на шуттель-аппарате (механический, транспортный стресс). Оказалось, что уже через 1 ч после стрессирования животных у них проявлялась тенденция к увеличению показателей стрессовой реакции организма. Через 24 ч увеличение таких показателей, как глюкоза и количество лейкоцитов в крови белых крыс, которым не задавали энтерин, были статистически достоверными, что продолжалось до 2-х суток. Аналогично изменялось и содержание общего белка в крови стрессированных, не леченных животных, с той только разницей, что это количество снижалось, причем также достоверно на протяжении 2-х суток. На третьи сутки показатели, характеризующие стрессовую реакцию, нивелировались и на четвертые сутки уже не отличались от здоровых контрольных животных. Одновременно установили, что стресс значительно снижал живую массу животных, которая восстанавливалась значительно медленнее, чем стрессовые показатели крови. На рисунке 1 представлены данные о влиянии энтерина на показатели глюкозы в крови при стрессе.



Рис.1. Адаптогенные свойства энтерина по показателям глюкозы (через 24ч после стресса, ммоль/л).


Полученные данные согласуются с результатами опытов А.А.Сухинина и соавт. (1989), А.А. Касаткина (1990), М.Э.Онуфриенко (1995), В.Д.Войтенко, Т.Б.Смирновой (1997).


2.6. Исследование иммуностимулирующих свойств энтерина


Иммуностимулирующие свойства энтерина определяли с помощью цитостатика циклофосфана. Предварительно подопытным крысам одной группы в течение 7 дней задавали энтерин в дозе 0,3 мл/кг, 2 раза в сутки. Второй подопытной группе энтерин не задавали. Третья группа служила контролем. За крысами наблюдали в течение 30 дней, определяя в крови общий белок, иммуноглобулин G, лейкоциты, в том числе лимфоциты. На 15 день от начала эксперимента у крыс, которым инъецировали цитостатик, наступало иммунодефицитное состояние. Содержание общего белка в крови снизилось с 29,7 г/л до 17,9 г/л. Уменьшилось процентное содержание иммуноглобулина G на 38%. Снизилась активность лизоцима на 27% и количество лейкоцитов на 24% Одновременно с этим снизилась и живая масса крыс (уменьшился прирост живой массы) на 22%.. В тоже время на этом фоне достаточно наглядно проявились корректирующие (иммуностимулирующие) свойства энтерина. Хотя у крыс и в этой группе наблюдалось снижение иммунологических показателей, но они были менее выражены и практически приближались к таковым контрольных животных. На 30 сутки эксперимента все иммунологические показатели в обеих подопытных группах восстанавливались до физиологических значений.


В дальнейшем иммуностимулирующие свойства энтерина были подтверждены при экспериментальном колибактериозе белых крыс и в опыте по методике В.М Земского и соавт. по снижению обсемененности органов и тканей животных кишечной палочкой. Можно предположить, что это снижение происходит как за счет как антимикробного действия энтерина, так и благодаря его иммунотропной активности. Наши данные согласуются с результатами В.М.Земского и соавт.(1977) и Н.Л.Андреевой (1992).


2.7. Изучение ростостимулирующего действия энтерина


Для выяснения ростостимулирующего действия энтерина его задавали в дозе 0,3 и 0,15 мл/кг. Препарат в обеих дозах увеличивал темпы роста животных, при этом большую эффективность регистрировали при назначении энтерина в заниженной дозе, Так, например, увеличение живой массы белых крыс в подопытных группах составляло: при дозе 0,3 мл/кг 103% и при дозе 0,15 мл/кг 105% по отношению к контролю.

Одновременно с этим в крови подопытных животных наблюдалась тенденция увеличения эритроцитов, гемоглобина, общего белка, лизоцима и бактерицидной активности сыворотки крови. Лучшие показатели регистрировались у животных, получавших заниженную дозу энтерина.

Более сильное ростостимулирующее действие энтерин проявлял на белых мышах. Так, например, увеличение живой массы белых мышей в подопытных группах составляло: при дозе 0,3 мл/кг 106% и при дозе 0,15 мл/кг 109% по отношению. Данные оказались статистически достоверными ( р < 0,05). Одновременно с этим, при дозе 0,6 мл/кг прирост живой массы белых крыс был таким же, как у животных контрольной группы (рис.2)




Рис.2. Влияние различных доз энтерина на рост и развитие белых мышей и белых крыс в процентах к контрольным животным.


2.8. Токсико-биологическая характеристика энтерина


При определении острой токсичности энтерина, в частности ЛД50 и ЛД100 нам не удалось установить эти показатели, поскольку максимально вводимые разовые дозы препарата (для белых крыс – 2,8 мл) не вызывали гибели лабораторных животных. В силу этого гипотетическая ЛД50 для крыс была более 14000мг/кг, что говорит об очень низкой токсичности препарата, если учесть тот факт, что по токсической классификации препараты, у которых ЛД50 превышает 1000 мг/кг относятся к малотоксичным соединениям.

В подостром опыте препарат задавали на протяжении 30 дней подряд в дозах в 2 и 4 раза превышающих оптимальные, т.е. 0,3; 0,6; и 1,2 мл/кг. Учитывали прирост живой массы, рост и развитие внутренних органов, гематологические и некоторые иммунобиохимические показатели. увеличение дозы диарина в 2 и 4 раза по сравнению с оптимальной практически не влияло на гематологические показатели и содержание глюкозы в крови белых крыс при месячном назначении препарата. В то же время проявлялась некоторая тенденция снижения содержания гемоглобина и увеличения лейкоцитов в крови белых крыс, получавших дозу диарина в 4 раза превышающую оптимальную по сравнению с животными, получавшими оптимальную дозу и контрольными животными. Однако эти различия оказались статистически недостоверным

Прежде чем проводить производственные испытания энтерина, препарат проверили в локальном опыте на небольшой группе больных диареей новорожденных телят, испытав 3 дозы: 0,3; 0,6 и 1,2 мл/кг в остром опыте и дозу 0,3 мл/кг на протяжении 10 дней подряд в субхроническом опыте. Выяснили, что в остром опыте при всех используемых 3-х дозах энтерина, не наблюдали никаких нежелательных отклонений в поведении животных. При выяснении возможной субхронической токсичности энтерина, проведенной на больных диареей телятах установили, что все телята поправились в течение 2-4 дней (в среднем 2.7 + 0,1 дня). Тогда как при лечении 10-и контрольных телят антибиотиками, регидратационными и вяжущими средствами срок лечения был от 3 до 6 дней (в среднем 4,1 + 0,2) и 1 теленок пал. При этом двум телятам пришлось применить интенсивную терапию с использованием регидратационных средств, витаминов, сердечных препаратов и других симптоматических средств. Обращает на себя и такой факт, что после 10-и дневного применения энтерина в крови выздоровевших телят регистрировали большее количество белка, эритроцитов, гемоглобина и некоторых показателей естественной резистентности организма (табл.3).


Таблица 3

Некоторые показатели крови телят в зависимости от лечении энтерином и лекарственными средствами, применяемыми в хозяйстве (M±m)


Группы животных

Лизоцим, %

Ig G, г/л

Эритроциты,

х1012

Общий белок, г/л

Энтерин

21,5 ± 1,4

14,1± 0,8

6,7± 0,4

61,3 ± 3,1*

Комплекс препаратов

21,9 ± 1,8

12,7± 0,9

5,8± 0,3

50,5 ±2,9

Примечание: * результат достоверный (р ≤ 0,05)


Эти данные дополнительно подтверждают безвредность энтерина для новорожденных телят и одновременно его достаточную лечебную эффективность. Кроме того, подтвердили, что выбранная доза энтерина 0,3 мл/кг является вполне эффективной при диарее и может быть отнесена к оптимальной при данной патологии.


2.9. Производственные испытания энтерина


Эффективность энтерина при экспериментальном колибактериозе лабораторных животных, его иммуностимулирующее, адаптогенное и ростостимулирующее действие при отсутствии отрицательного влияния на организм животных, дали основание для проведения производственных испытаний препарата. Опыты провели в 2-х хозяйствах Ленинградской области, Волосовского района - ЗАО «Ущевицы» и ОАО «Остроговицы» на поголовье 1151 теленок. Энтерин применили 367-и телятам, в том числе с профилактической целью – на 154 телятах и с лечебной целью на 213 телятах. Препарат сравнивали с диарином (167 голов, в том числе 90 с лечебной целью и 77 с профилактической целью) и химиопрепаратами с вяжущими и другими лечебными средствами – антибиотиком левомицетином и фторхинолоном байтрилом на поголовье 617 голов. Профилактическая эффективность энтерина составила 88,7% (у диарина 90%), лечебная – 93% (у диарина – 95%). Профилактическая эффективность химиопрепаратов составила 80% и лечебная 75%.

Таблица 4

Профилактическая эффективность препаратов при диареях телят


Наименование групп

Кол-во голов

Заболело

(голов)

%

Пало

(голов)

%

Энтерин

154

18

11,68

-

-

Байтрил

100

21

21

2

2

Диарин.

77

6

7,79

-

-

Антибиотик

125

25

20

3

3

Контроль

50

40

80

2

4


Из 213 телят, которых лечили энтерином 15 голов (7%) переболевало тяжело. Этим телятам пришлось применить интенсивную терапию с использованием солевых растворов, энроксила, строфантина и гепарина (комплексный метод лечения токсических диспепсий, разработанный на кафедре внутренних незаразных болезней СПбГАВМ). В группе телят, которых лечили методом принятом в хозяйстве примерно из этого количества интенсивную терапию пришлось применить 52 телятам (25%). В обоих случаях лечение оказалось эффективным. В группе, которым ранее применялся энтерин не пал ни один теленок, во второй группе пало 3 теленка (6%).

Применение энтерина и диарина способствовало повышению общей сохранности молодняка и в дальнейшем снижению бронхопневмоний у телят старших возрастов. Так, например, в ОАО «Остроговицы» сохранность телят в 2006 г. составляла 80%, то уже в 2007 году, когда начали применять энтерин и диарин она составляла 90,5%, а в 2008 году – 95,5%. Одновременно с этим в 2006 году было зарегистрировано 45% телят больных бронхопневмониями, в 2007 году – 40%, в 2008 году – 30% и в 2009 году этот показатель снизился до 23%.

Почти аналогичная динамика заболеваемости телят регистрировалась и в ЗАО «Ущевицы». В этом хозяйстве сохранность телят в 2006 году составляла 87%, в 2007 году она повысилась до 92% и в 2008 году составила 98,3%. В эти же года регистрировали и снижение заболеваемости телят бронхопневмониями. Например, в 2006 году бронхопневмониями заболело 45% телят, в 2007 году 40% , в 2008 году 10% и в 2009 – 8,7 (табл.5).

Таблица 5

Динамика сохранности и заболеваемости телят бронхопневмонией

в хозяйствах по годам при использовании энтерина



Год

ОАО «Остроговицы»

ЗАО «Ущевицы»

Сохранность телят, %

Кол-во телят, заболевших бронхопневмонией, %

Сохранность телят, %

Кол-во телят, заболевших бронхопневмонией, %

2006

80

45

87

45

2007

90,5

40

92

40

2008

95,5

30

98,3

10

2009

97,3

23

98,7

8,7


Проведенные исследования показали, что вновь созданное антидиарейное средство – энтерин, обладает выраженным профилактическим и лечебным эффектом при диареях новорожденных телят и по этим показателям приближается к диарину (профилактическое действие почти одинаковое, лечебное несколько меньшее). В тоже время энтерин дешевле диарина и несколько экологичнее последнего. Новый препарат оказался эффективнее антибиотика левомицетина и фторхинолона байтрила и использование энтерина оказалось экономически выгоднее, не говоря уже об экологическом преимуществе. Расчеты показали, что при использовании химиопрепаратов стоимость затрат на одного теленка составила 74 рубля, тогда как при назначении энтерина – 23 рубля, то есть в три раза меньше (рис.3).




Рис.3. Стоимость лечения одного теленка, больного диареей, разными препаратами.


Кроме того, энтерин проявлял позитивное фармакологическое последействие при дальнейшем выращивании телят (табл. 6).


Таблица 6.

Прирост массы и возникновение бронхопневмоний у телят

в зависимости от лечения диарей (возраст 30 дней) (M±m)


№ п/п

Группы, препараты

Живая масса, кг

Возникновение бронхопневмоний, %

1.

Контроль

54,3± 1,7

5,7

2.

Препараты хозяйства

54,1± 1.6

5,9

3.

Энтерин

55,1± 1,4

4,3


Таким образом, при назначении энтерина, телята лучше росли и развивались и их организм был более устойчив в возникновении легочных болезней, по сравнению с применением антимикробных препаратов для лечения диарей.


3. ВЫВОДЫ


1. Разработано новое эффективное, экологически чистое антидиарейное средство, специально для новорожденных телят, по эффективности приближающееся к диарину, но дешевле его.

2. Энтерин проявляет антимикробное, иммуностимулирующее, адаптогенное и ростостимулирующее действие, чем и объясняется его антидиарейный эффект.

3. Профилактическая эффективность энтерина при диареях новорожденных телят составляет 87%. лечебная – 92,3%., тогда как у антибиотика левомицетина и фторхинолона байтрила эти показатели составляют соответственно 75 и 83%.

4. Энтерин обладает более сильным позитивным фармакологическим последействием по сравнению с химиопрепаратами. Это действие проявляется более быстрым ростом и развитием телят до месячного возраста и уменьшением бронхопневмоний у растущих животных.

5.Применение энтерина при профилактике и лечении диарей у новорожденных телят значительно дешевле, чем использование для этих целей химиопрепарата. Стоимость лечения химиопрепаратами одного теленка составляет 74 рубля, а при назначении энтерина 23 рубля.

6. Токсикологические исследования показали безвредность энтерина для лабораторных животных и телят

7. Производству предложены рекомендации по применению энтерина для профилактики и лечения диарей у новорожденных телят.


4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ


1. Разработаны рекомендации по применению энтерина для профилактики и лечения диарей у новорожденных телят, которые одобрены и рекомендованы к печати Научным координационным советом по животноводству и ветеринарии Северо-Западного научно-методического центра Россельхозакадемии (протокол №2 от 10.09.2008 г.).

2.Полученные результаты используются в учебном процессе на кафедрах фармакологии и токсикологии и внутренних незаразных болезней ФГОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины».

3. Для практических работников изданы рекомендации по применению энтерина в животноводческих хозяйствах.


5. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ

ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ


Статья в журнале из списка, рекомендованного ВАК Минобразования и науки РФ

  1. Власова Л.М. Разработка и испытание антидиарейного средства энтерин / Л.М. Власова // Ветеринарная практика. - 2008. - №3. - С.108-110.

Работы, опубликованные в сборниках научных трудов и материалов конференций

  1. Соколов В.Д. Разработка нового антидиарейного средства Энтерин / В.Д. Соколов, Н.Л. Андреева, В.Д. Войтенко, Н.В. Визаулина, Т.В. Абакумова, Л.С. Фогель, Л.М. Власова // Новые ветеринарные препараты и кормовые добавки. - СПб., 2005. - вып. 16. – С. 6-7.
  2. Власова Л.М. Изучение возможного побочного действия энтерина / Л.М. Власова // Новые фармакологические средства в ветеринарии: Матер. XVIII междунар. межвуз. науч.-практич. конф. - СПб., 2006. – С.143-144.


  3. Власова Л.М. Ростостимулирующие свойства энтерина / Л.М. Власова // Новые фармакологические средства в ветеринарии: Мат. XVIII междунар. межвуз. науч.-практич. конф. - СПб., 2006. – С.50-51.

  4. Фогель Л.С. Эффективные средства при диареях телят / Л.С. Фогель, Л.М. Власова // Новые ветеринарные препараты и кормовые добавки. - СПб., 2006. - вып. 17. – С. 31-32.

  5. Власова Л.М. Лечебно-профилактические свойства антидиарейного средства – энтерин / Л.М. Власова // Новые фармакологические средства в ветеринарии: Мат. XIX междунар. межвуз. науч.-практич. конф. - СПб., 2007. – С.9-10.

  6. Власова Л.М. Применение диарина и энтерина при диареях новорожденных телят / Л.М. Власова, О.Г. Петрова, Н.П. Усмонова // Перспективы и преимущества применения ветеринарных препаратов и пищевых добавок на основе молочной кислоты: Матер. семинара. - СПб., 2008. – С.29-30.

  7. Власова Л.М. Сравнительная оценка эффективности антидиарейного средства – энтерин / Л.М. Власова // Эффективные и безопасные лекарственные средства: Матер. Первого междунар. конгресса ветеринарных фармакологов. - СПб. 2008. – С.14-15.

  8. Власова Л.М. Производственные испытания энтерина при диареях новорожденных телят / Л.М. Власова // Эффективные и безопасные лекарственные средства в ветеринарии: Матер. Всероссийского Съезда ветеринарных фармакологов и токсикологов. - СПб., 2009. – С. 19-20.



Добавить документ в свой блог или на сайт
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:

Похожие:

Фармако-токсикологическая характеристика энтерина 06. 02. 03 ветеринарная фармакология с токсикологией iconФармако-токсикологическая характеристика тетраголда 16. 00. 04 ветеринарная фармакология с токсикологией

Фармако-токсикологическая характеристика энтерина 06. 02. 03 ветеринарная фармакология с токсикологией iconФармако-токсикологическая и терапевтическая оценка новых лекарственных форм анандина 16. 00. 04 Ветеринарная фармакология с токсикологией

Фармако-токсикологическая характеристика энтерина 06. 02. 03 ветеринарная фармакология с токсикологией iconФармако-токсикологические свойства гепакардина и его применение в гериатрии 06. 02. 03 ветеринарная фармакология с токсикологией

Фармако-токсикологическая характеристика энтерина 06. 02. 03 ветеринарная фармакология с токсикологией iconФармако-токсикологические свойства и лечебно-профилактическая эффективность цидисепта-о при колибактериозе поросят и телят 16. 00. 04 ветеринарная фармакология с токсикологией

Фармако-токсикологическая характеристика энтерина 06. 02. 03 ветеринарная фармакология с токсикологией iconЭпизоотологическая характеристика и фармакотерапия основных паразитозов крупного рогатого скота Центральной зоны Российской Федерации авермектинсодержащими препаратами 03. 02. 11 паразитология 06. 02. 03 ветеринарная фармакология с токсикологией

Фармако-токсикологическая характеристика энтерина 06. 02. 03 ветеринарная фармакология с токсикологией iconКлиническая фармакология линимента «ар-аз» в сочетании с иммуномодулятором «тамерит» при лечении хирургических ран собак 06. 02. 03 ветеринарная фармакология с токсикологией

Фармако-токсикологическая характеристика энтерина 06. 02. 03 ветеринарная фармакология с токсикологией iconПрограмма-минимум кандидатского экзамена по специальности 06. 02. 03 «Ветеринарная фармакология с токсикологией» по ветеринарным и биологическим наукам
В основу настоящей программы положены следующие дисциплины: фармакология и токсикология

Фармако-токсикологическая характеристика энтерина 06. 02. 03 ветеринарная фармакология с токсикологией icon06. 02. 03 – Ветеринарная фармакология с токсикологией

Фармако-токсикологическая характеристика энтерина 06. 02. 03 ветеринарная фармакология с токсикологией iconФармакостимуляция продуктивности животных пробиотическими препаратами 16. 00. 04 ветеринарная фармакология с токсикологией

Фармако-токсикологическая характеристика энтерина 06. 02. 03 ветеринарная фармакология с токсикологией iconПрограмма вступительного экзамена в аспирантуру по специальной дисциплине 06. 02. 03 «Ветеринарная фармакология с токсикологией»*

Поместите кнопку у себя на сайте:
Образование


База данных защищена авторским правом ©cow-leech 2000-2013
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
COW-LEECH.RU