Терапевтическая эффективность гинодиксина при эндометритах и маститах у коров, вызванных условно-патогенной микрофлорой 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 06. icon

Терапевтическая эффективность гинодиксина при эндометритах и маститах у коров, вызванных условно-патогенной микрофлорой 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 06.





Скачать 301.86 Kb.
НазваниеТерапевтическая эффективность гинодиксина при эндометритах и маститах у коров, вызванных условно-патогенной микрофлорой 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 06.
СКОМАРОВА МАРИЯ НИКОЛАЕВНА
Дата конвертации03.06.2013
Размер301.86 Kb.
ТипАвтореферат диссертации
На правах рукописи


СКОМАРОВА МАРИЯ НИКОЛАЕВНА


ТЕРАПЕВТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ

ГИНОДИКСИНА ПРИ ЭНДОМЕТРИТАХ

И МАСТИТАХ У КОРОВ, ВЫЗВАННЫХ

УСЛОВНО-ПАТОГЕННОЙ МИКРОФЛОРОЙ


06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология,

микология с микотоксикологией и иммунология

06.02.03 – ветеринарная фармакология с токсикологией


Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата ветеринарных наук


Новосибирск – 2010

Работа выполнена в Государственном научном учреждении Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии и закрытом акционерном обществе «Росветфарм»


Научный руководитель: доктор ветеринарных наук

Распутина Ольга Викторовна


Научный консультант: доктор ветеринарных наук, профессор
Шкиль Николай Алексеевич



Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук,

старший научный сотрудник

Смертина Елена Юрьевна,


доктор биологических наук, профессор

Топурия Лариса Юрьевна


Ведущая организация: Институт ветеринарной медицины ФГОУ ВПО

«Омский государственный аграрный университет»


Защита состоится «15» июня 2010 г. в 13:00 ч. на заседании диссертационного совета Д.006.045.01 при ГНУ Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии по адресу: 630501, Новосибирская обл., Новосибирский р-н, п. Краснообск, ГНУ ИЭВСиДВ, а/я 8, тел/факс (383) 348-44-62


С диссертацией можно ознакомиться в Сибирской научной сельскохозяйственной библиотеке Россельхозакадемии.


Автореферат разослан «___»__________2010 г.


Ученый секретарь

диссертационного совета Стеблева Г.М.


  1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ



Актуальность проблемы. В современных условиях ведения животноводства особую актуальность приобретают мероприятия, направленные на повышение продуктивности животных и качества сельскохозяйственной продукции.

Одной из главных причин, снижающей темпы воспроизводства и продуктивности молочного скота, являются заболевания репродуктивных органов и молочной железы, которые имеют широкое распространение и во многих случаях проявляются одновременно, либо одна сменяет другую.

Эти болезни связаны с огромными потерями молока за счет уменьшения молочной продуктивности, сокращения срока хозяйственного использования коров, недополучения приплода (П.Н. Никоноров, 1987; Т.Е. Григорьева, 1990; Э. Анюлис с соавт., 2009; Ю.Н. Алехин, 2009; А.Я. Батраков с соавт., 2009; И.С. Коба, А.Н. Турченко, 2009).

Многие авторы ведущую роль в этиологии указанных болезней отводят микроорганизмам (бактериям, грибам и вирусам). На микробный фактор приходится около 72–86% всех случаев мастита и эндометрита у коров. Из секрета пораженных четвертей вымени и маточно-влагалищного экссудата коров выделяют условно-патогенную микрофлору (стафилококки, стрептококки, эшерихии, иерсинии), которая вызывает заболевание либо наслаивается на патологический процесс, вызванный другими факторами (В.А. Париков, 1990; А.Г. Шахов, 2005).

Разработке эффективных методов, средств терапии и профилактики посвящены многие работы отечественных и зарубежных ученых. Несмотря на достижения в этой области, маститы и эндометриты распространены повсеместно, носят массовый характер, причиняют значительный экономический ущерб. Нередко применяемые фармакологические средства малоэффективны, схемы их применения трудоемки, неудобны для выполнения, либо дорогостоящие (А.В. Андреева, 2003).

В связи с этим, актуальными являются комплексные исследования, направленные на разработку и применение новых более эффективных лекарственных средств.

Цель исследований. Разработать рациональный способ терапии послеродового эндометрита и мастита, вызываемых условно-патогенной микрофлорой у коров, на основе применения комплексного лекарственного средства гинодиксин.

Для достижения указанной цели были поставлены задачи:

1. Определить состав микрофлоры и ее свойства при послеродовом гнойно-катаральном эндометрите и серозном мастите.

2. Изучить противовоспалительное действие гинодиксина.

3. Оптимизировать способ применения гинодиксина при гнойно-катаральном эндометрите и серозном мастите и дать оценку его терапевтической и экономической эффективности.

Научная новизна работы. Разработано лекарственное средство гинодиксин и способ его применения (патент РФ № 2287329 от 20.11.06 г.).

Определена чувствительность микрофлоры, участвующей в акушерско-гинекологических патологиях у коров, к применяемым антибактериальным препаратам и комплексному лекарственному средству гинодиксин.

Выявлено преимущественное значение при послеродовом гнойно-катаральном эндометрите бактерий рода: Staphylococcus, Enterobacter, Citrobacter, при серозном мастите - Staphylococcus, Streptococcus.

Впервые раскрыт механизм противовоспалительного действия гинодиксина, основанный на его противоотечном эффекте, активизации репаративных процессов и антиоксидантного статуса организма, снижения АМК-генерирующей активности нейтрофилов крови и повышения их реактивности.

Определена терапевтическая и экономическая эффективность гинодиксина при послеродовом гнойно-катаральном эндометрите и серозном мастите у коров.

Теоретическая и практическая значимость работы. На основе результатов научных исследований предложен новый способ терапии послеродового эндометрита у коров, позволяющий повысить эффективность лечения больных животных за счет механизма противовоспалительного действия гинодиксина, обусловленного активацией реактивности нейтрофилов, снижением их способности к синтезу активных метаболитов кислорода, антиоксиданным эффектом, а также стимуляцией репаративных процессов.

По результатам исследований подготовлены две методические рекомендации «Применение ветеринарных препаратов на основе синтетического аналога фитогормона для профилактики и лечения заболеваний сельскохозяйственных животных» (прот. №3, 2006 г.) и «Фармакологические свойства и применение лекарственного средства гинодиксин в ветеринарии» (прот. № 3, 2009 г.), утвержденные подсекцией «Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока» отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены на: Международном симпозиуме «Научные основы обеспечения защиты животных от экотоксикантов, радионуклеидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний» (Казань, 2005); VI Сибиркой ветеринарной конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (Новосибирск, 2006); Международной научно-практической конференции, посвященной 60-летию ГНУ Краснодарского НИВИ «Актуальные проблемы ветеринарии в современных условиях» (Краснодар, 2006); Международной научно-практической конференции «Современные технологии производства и переработки сельскохозяйственной продукции» (Новосибирск, 2009); II Сибирском ветеринарном конгрессе «Актуальные вопросы ветеринарной медицины» (Новосибирск, 2010).

Публикации результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 9 научных работ, в том числе 2 статьи в рецензируемых научных журналах, рекомендованных ВАК Минобразования и науки РФ («Ветеринария», «Сибирский вестник сельскохозяйственной науки»).

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 130 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов исследований, обсуждения результатов, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения. Работа иллюстрирована 13 таблицами и 20 рисунками. Список литературы включает 203 источника, в т.ч. 50 зарубежных авторов.

Внедрение результатов исследований. Разработано и внедрено в производство лекарственное средство гинодиксин, ежегодное производство которого составляет 1,5 – 2,0 тыс. л, достаточного для обработки 4,0 тыс. гол.

Разработанное лекарственное средство гинодиксин зарегистрировано в России (ПВР-2-8.6/01985 от 09.07.07 г.).

Производство препарата осуществляется в ЗАО «Росветфарм» (р.п. Краснообск, Новосибирской области).

Основные положения, выносимые на защиту:

- данные по изучению состава микрофлоры при послеродовом гнойно-катаральном эндометрите и серозном мастите у коров;

- результаты изучения противовоспалительного действия лекарственного средства гинодиксин;

- обоснование терапевтической и экономической эффективности гинодиксина при послеродовом гнойно-катаральном эндометрите и серозном мастите.


2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы исследований


Работа выполнена в лаборатории по разработке новых методов лечения животных Государственного научного учреждения Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока и в ЗАО «Росветфарм», в 2004 – 2009 гг. Экспериментальные и клинические исследования по теме диссертации проводились в НИИ клинической иммунологии СО РАМН и в сельскохозяйственных предприятиях Новосибирской и Кемеровской областей.

При мониторинге акушерско-гинекологических патологий у коров анализировали отчетную документацию Управления ветеринарии Новосибирской области.

Для определения состава условно-патогенной микрофлоры, полевые изоляты, выделенные от больных коров, дифференцировали путем посева на элективные среды и с помощью «Определителя бактерий Берджи» (2001). Дифференциацию микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae проводили с использованием «Систем индикаторных бумажных для идентификации микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae» (производство ФГУП «НПО «Микроген» МЗ РФ, г. Нижний Новгород) с последующей их дифференциацией в компьютерной экспертной системе «Биохимия микроорганизмов 2.0».

Определение чувствительности выделенных микроорганизмов к антибактериальным препаратам и гинодиксину проводили методом диффузии в агар с применение дисков в соответствии с «Методическими указаниями по определению чувствительности к антибиотикам возбудителей инфекционных болезней сельскохозяйственных животных» (утвержд. ГУВ МСХ СССР 30.10.1971 г.).

Антиоксидантную активность препарата изучали на базе НИИ клинической иммунологии совместно с Распутиной О.В., Цырендоржиевым Д.Д. Оценку прооксидантной (ПОА) и антикосидантной активности (АОА) сыворотки крови больных эндометритом коров проводили до лечения (n=8) и после окончания курса терапии (n=6). Для контроля использовали сыворотку крови здоровых коров (n=8). Исследования проводили с помощью биохемилюминометра «СКИФ-0306М» (НПО «Наука», Красноярск).

Терапевтическую эффективность препарата при послеродовом гнойно-катаральном эндометрите и серозном мастите у коров, вызываемых условно-патогенной микрофлорой, изучали на базе ГНУ ИЭВСиДВ и в хозяйствах Новосибирской и Кемеровской областей.

Острую токсичность гинодиксина определяли руководствуясь «Методическими указаниями по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве» (Л.П. Маланин, А.П. Морозов, А.С. Селиванова, 1988), «Методическими рекомендациями по изучению общетоксического действия фармакологических средств» (Е.В. Арзамасцев с соавт., 1997) и «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ (Р.У. Хабриев с соавт., 2005).

Для проведения исследований по изучению острой токсичности было использовано 100 белых нелинейных мышей с массой тела 19-21 г и 24 белых беспородных крыс с массой тела 120-140 г.

Эксперименты по оценке противовоспалительной активности гинодиксина проведены на 45 крысах-самцах линии Вистар массой тела 150-180 г. Экспериментальное экссудативное воспаление (ЭЭВ) индуцировали введением в субплантарный (подошвенный) апоневроз правой задней лапки крыс 0,05 мл полного адъюванта Фрейнда («Sigma», США). Через 1 ч после введения адъюванта Фрейнда подкожно вводили гинодиксин.

В качестве критериев, характеризующих тяжесть ЭЭВ, были выбраны следующие показатели: масса тела, размер правых задних конечностей, общая температура, а также количество и состав лейкоцитов в периферической крови и в экссудате из зоны поражения. Дополнительно оценивали суммарный хемилюминесцентный ответ (ХЛ-ответ) клеток крови (нейтрофилов) и их реактивность, про- и антиоксидантную активность сыворотки крови.

Результаты полученных исследований обрабатывали с помощью методов математической статистики (Г.Ф. Лакин, 1990), а также с помощью лицензированных пакетов прикладных программ «Statistica 5.0» и «Microsoft Exel 7.0» на PC Pentium-IV.

Производственные испытания лечебной эффективности изучаемого препарата проведены в хозяйствах Новосибирской и Кемеровской областей на 654 коровах (ГУСП ОПХ «Элитное», ЗАО «Совхоз Морской», ООО «Моховское»).

Экономическую эффективность лечебных мероприятий определяли согласно утвержденной МСХ и П РФ в 21.02.97 г. «Методике определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий».

Автор выражает искреннюю благодарность научному руководителю - доктору ветеринарных наук О.В. Распутиной, научному консультанту - доктору ветеринарных наук, профессору Н.А. Шкилю, доктору медицинских наук, профессору НИИ клинической иммунологии СО РАМН Д.Д. Цырендоржиеву руководству ЗАО «Росветфарм» в лице М.Н. Дольниковой и Н.А. Дровосекова.


2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.2.1. Определение состава микрофлоры

и ее свойств при послеродовом гнойно-катаральном

эндометрите и серозном мастите у коров


Анализ распространения акушерско-гинекологических патологий у коров проводили на примере хозяйств Новосибирского района с использованием данных ветеринарной отчетности в период 1997 – 2007 гг. включительно.

При анализе данных было установлено, что наряду с сокращением количества сельскохозяйственных предприятий неуклонно сокращается поголовье коров. За анализируемый период оно уменьшилось на 35,7%.

В структуре акушерско-гинекологических патологий у коров преобладают мастит (6,44 – 38,07%), эндометрит (2,8 – 14,99%), задержание последа (2,8 – 7,76%).

Результаты анализа динамики акушерско-гинекологических патологий указывают на возрастание количества больных маститами – на 6,46%, увеличение числа мертворожденных – на 0,11%. Пик заболеваемости маститами приходится на 2005 г. (количество больных по сравнению с 1997 г. увеличилось на 26,74%).

Для определения состава условно-патогенной микрофлоры нами был исследован биологический материал: маточно-влагалищные выделения и секрет пораженных долей вымени коров, больных послеродовым гнойно-катаральным эндометритом и серозным маститом.

При бактериологическом исследовании маточно-влагалищных выделений от 52 коров, больных послеродовым гнойно-катаральным эндометритом, выделена условно-патогенная микрофлора. В 48 пробах (92,3%) изолированы ассоциации с преобладанием бактерий рода Staphylococcus, Enterobacter, Citrobacter. Патогенность выделенных ассоциаций проявлялась в 9,61%. В 4 пробах (7,69%) изолированы монокультуры рода Salmonella и Pasteurella.

При микологическом исследовании 52 проб влагалищной слизи в 6 пробах (11,54%) были изолированы Mucor, Aspergillus, в 4 пробах (7,69%) - Penicillium.

Чувствительность выделенной микрофлоры исследовали к 23 антибактериальным средствам.

Антимикробные препараты (АМП), по степени чувствительности к ним микрофлоры, были разделены на 3 группы. К первой группе отнесли АМП с высокой степенью активности к выделенной микрофлоре (зона задержки более 25 мм): энрофлокс, гинодиксин, тилан. Ко второй группе – АМП со средней степенью чувствительности (зона задержки 15 – 25 мм): гентамицин, амикацин, карбенициллин, цефазолин, окситетрациклин, левомицетин, фурадонин, рифампицин. К третьей группе – АМП, обладающие слабой активностью по отношению к выделенной микрофлоре (зона задержки до 15 мм): ампициллин, неомицин, доксициклин, мономицин, стрептомицин, канамицин, тетрациклин бензилпенициллин, эритромицин, линкомицин. Следует указать отсутствие чувствительности микрофлоры к оксациллину, полимиксину.

При бактериологическом исследовании секрета долей вымени от 42 коров, выделены условно-патогенные микроорганизмы, относящиеся к 7 родам. Среди выделенных культур в пробах преобладают изоляты, относящиеся к классу Bacilli: Staphylococcus, Streptococcus.

Условно-патогенная микрофлора выделялась преимущественно в виде ассоциаций: из 42 проб в 34 (80,95%) выделены ассоциации микроорганизмов. Патогенность выделенных ассоциаций составила 14,28%.

В 8 пробах (19,04%) выделены монокультуры: Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis.

Оценка чувствительности изолированной микрофлоры была проведена в отношении восьми антибактериальных средств, в том числе: мастисана-А, мастицида, а также разработанного нами гинодиксина.

Разная степень чувствительности микрофлоры позволила, так же как и в первом случае, выделить 3 группы антимикробных препаратов (АМП). Первая группа – АМП, с высокой степенью активности к выделенной микрофлоре (зона задержки более 25 мм): гинодиксин. Вторая группа – АМП, со средней степенью чувствительности (зона задержки 15 – 25 мм): мастисан-А, гентамицин. Третья группа – АМП, обладающие слабой активностью по отношению к выделенной микрофлоре (зона задержки до 15 мм): тетрациклин, неомицин, мастицид, стрептомицин, эритромицин.

Таким образом, результаты анализа ветеринарной отчетности указывают на сокращение количества сельскохозяйственных предприятий и маточного поголовья коров в хозяйствах Новосибирского района. Несмотря на это, наибольшее распространение у коров имеют такие патологии, как мастит, эндометрит, задержание последа.

При послеродовом эндометрите и мастите условно-патогенная микрофлора преимущественно выявляется в виде ассоциаций с преобладанием при эндометритах бактерий, относящихся к родам Staphylococcus, Enterobacter, Citrobacter, при маститах - Staphylococcus, Streptococcus. Выделение ассоциаций и монокультур условно-патогенной микрофлоры, обладающей в 12% случаев патогенностью, указывает на ее роль в развитии эндометритов и маститов у коров.

Чувствительность микрофлоры характеризовалась высокой степенью вариабельности. В связи с этим, при конструировании лекарственных средств и проведении лечебных мероприятий следует отдавать предпочтение антимикробным препаратам в соответствии с чувствительностью к ним микрофлоры.

2.2.2. Комплексная оценка гинодиксина

2.2.2.1. Общая характеристика препарата


Гинодиксин представляет собой стерильный, прозрачный раствор желто-зеленого цвета. В его состав входят: 1,4-Ди-N-окись 2,3-бис (оксиметил) хиноксалин; трис (2-оксиэтил) аммония орто-крезоксиацетат; органические и неорганические растворители.

Результаты изучения острой токсичности гинодиксина, показали, что внутрибрюшинное введение белым мышам в максимально допустимой дозе для данного способа введения (1,0 мл/гол. – 50 мл/кг) приводит к гибели 60% экспериментальных животных. У оставшихся в живых мышей регистрировали нарушение двигательной и тактильной чувствительности, которые через 3,5 – 8 часов после введения гинодиксина исчезали, клиническое состояние животных приходило в норму.

При внутрижелудочном введении препарата в дозе 1,0 мл/гол. – 50 мл/кг летальность достигла самого высокого значения для данного способа введения – 40%.

Таким образом, при внутрибрюшинном и внутрижелудочном введении белым мышам 100% летальность отсутствует. ЛД50 при внутрибрюшинном введении составила 47,5 мл/кг (по АДВ – 475,0 мг/кг).

Установлено, что белые крысы, при исследуемых способах введения, к препарату не чувствительны. В соответствии с ГОСТом 12.1.007-76 «Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности» гинодиксин отнесен к малотоксичным соединениям III класса опасности.

Антиоксидантная активность препарата изучена на 22 коровах в возрасте 3 – 5 лет черно-пестрой породы, на базе ГУСП ОПХ «Элитное» Новосибирского района.

Для оценки влияния гинодиксина на атиоксидантную активность сыворотки крови больных гнойно-катаральным эндометритом коров, его вводили 4 – 8 раз в дозе 100 мл с интервалом 24 часа.

При исследовании сыворотки крови установлено, что у коров, больных послеродовым гнойно-катаральным эндометритом, возрастает прооксидантная активность и снижается антиоксидантная. При этом, прооксидантная активность может достигать 1501,90±346,51 отн.ед. (Р ≤ 0,05), а антиоксидантная - 11,63±1,92 отн.ед. (Р ≤ 0,05).

После введения гинодиксина прооксидантная активность сыворотки крови снижается (до 486,25±184,02 отн.ед.), а антиоксидантная повышается (до 25,41±3,42 отн.ед., Р ≤ 0,05) и становится соизмеримой с показателями у здоровых коров. В соответствии с этим, коэффициент соотношения (Кс) ПОА/АОА снижается в 6,6 раза (от 129,14±30,46 до 19,13±3,09 отн.ед., Р ≤ 0,05) по сравнению с таковым у больных животных.

Таким образом, лекарственное средство гинодиксин относится к малотоксичным веществам, обладает антиоксидантным действием.


2.2.2.2. Изучение противовоспалительного действия гинодиксина


Опыты проводили на крысах линии Вистар, которые были разделены на 3 группы: I-я группа (контрольная) – 5 крыс, которым в субплантарный (подошвенный) апоневроз правой задней лапки вводили по 0,05 мл физиологического раствора; II-я группа – 20 крыс с индуцированным экспериментальным экссудативным воспалением (ЭЭВ); III-я группа – 20 крыс с индуцированным ЭЭВ, которым вводили гинодиксин.

Через 1 сутки после введения адъюванта Фрейнда развивалось экссудативное воспаление правой задней лапки, размер которой был увеличен в 3,6 раза по сравнению с таковыми у животных контрольной группы (1,3±0,04 см3) и в среднем составил 4,7±0,15 см3. На последующих сроках исследования (3, 7 и 14 сутки) размер правой лапки крыс с экссудативным воспалением постепенно снижался до 3,9±0,24 см3; 3,4±0,12 см3 и 2,5±0,16 см3, соответственно.

У крыс III группы после введения гинодиксина размер правой лапки снижался быстрее, чем у крыс II группы, хотя после однократной его инъекции данный показатель практически не менялся (1 сут). На 3, 7 и 14 сутки различия в изменениях размера правой лапки между крысами II и III групп были более заметными. Так, на 3 сутки после введения гинодиксина данный показатель составил 3,4±0,11 см3, а к 14 суткам снизился до 1,6±0,13 см3.

Таким образом, на 14 сутки исследования отек правой лапки крыс с ЭЭВ снижался на 46,8%, а на фоне гинодиксина – на 65,2% (Р ≤ 0,05).

Температуры тела у крыс контрольной группы в среднем составила 37,8±0,08С. Через 1 сутки после индукции ЭЭВ температура у крыс II-й группы возросла до 39,6±0,29С. На 3 сутки развития ЭЭВ зафиксированы ее максимально высокие значения - 40,9±0,24С. Высокие значения температуры у крыс этой группы сохранялись до конца срока исследования. Так, на 7 и 14 сутки исследования средние значения температуры у крыс с ЭЭВ соответственно составили 39,0±0,17С и 38,9±0,19С.

Введение гинодиксина крысам с ЭЭВ (III группа) приводило к более заметному снижению температуры. Однако, повышенный уровень температуры, но менее выраженный, чем у крыс II-й группы, сохранялся до 14 суток исследования. Так, среднее значение температуры в динамике исследования (1, 3, 7 и 14 сутки) после введения гинодиксина соответственно составило 39,2±0,15С; 39,8±0,23С; 38,4±0,15С и 38,2±0,16С, соответственно.

Масса тела крыс контрольной группы до начала эксперимента в среднем составляла 169,4±1,76 г, а в день убоя (14 сут.) – 188,2±1,89 г, что на 11,1% выше исходного состояния. В то же время, в динамике развития ЭЭВ (II группа) наблюдается неуклонное снижение массы тела крыс. Так, максимальное снижение массы тела крыс данной группы наблюдается на 7 сутки исследования (-17,4±0,61% относительно исходного веса до начала опытов), а на 14 сутки – характер снижения веса животных практически остается на том же уровне (-10,8±0,75%).

Введение гинодиксина препятствует резкому снижению массы тела у крыс с ЭЭВ. Так, на 7 сутки исследования снижение массы тела в этой группе животных относительно исходного веса составило 9,1±0,8%, а на 14 сутки – 4,2±0,9%.

Одним из важных показателей активности воспалительного процесса является изменение клеточного состава периферической крови, а также экссудата в зоне воспаления.

Результаты проведенного нами исследования показали, что общее количество лейкоцитов в периферической крови крыс на всем протяжении наблюдения после индукции ЭЭВ остается на достоверно высоком уровне. В то же время, введение гинодиксина приводит к заметному снижению их числа в крови уже к 3-м суткам наблюдения и затем неуклонно происходит уменьшение (рис. 1).





Рисунок 1 – Динамика общего количества лейкоцитов в периферической крови у крыс различных групп


Снижение общего количества лейкоцитов под действием тестируемого препарата происходило в результате снижения численности нейтрофильных гранулоцитов на фоне сохранения количества моноцитов к концу срока наблюдения (рис. 2, 3).





Рисунок 2 – Динамика общего количества нейтрофилов в периферической крови крыс различных групп




Рисунок 3 – Динамика общего количества моноцитов в периферической крови крыс различных групп


Анализ клеточного состава экссудата из пораженной конечности выявил подобные изменения, как и в периферической крови.

Таким образом, при введении гинодиксина происходит более выраженное снижение количества нейтрофилов на фоне моноцитоза, как в периферической крови, так и в экссудате из зоны ЭЭВ конечности крыс.

Исследование функционального состояния нейтрофилов периферической крови крыс с ЭЭВ правой задней конечности показало, что величины их суммарного хемилюминисцентного ответа (Isum ХЛ-ответ) на всех сроках наблюдения достоверно превышали контрольные значения (табл. 1).

Введение гинодиксина приводило, за исключением третьих суток наблюдения, к снижению спонтанного Isum ХЛ ответа нейтрофилов крыс с ЭЭВ. Однако к концу срока наблюдения данный показатель оставался более высоким, чем у крыс контрольной группы. Кроме того, при введении гинодиксина ХЛ ответ нейтрофилов крови на дополнительный стимул (ЗГ-Isum) был выше, чем у крыс с ЭЭВ (II группа) (табл. 1).

Анализ результатов расчета индекса стимуляции (ИС), отражающего реактивность нейтрофилов, показал, что на 1, 3 и 7 сутки наблюдения у крыс обеих групп данный показатель был ниже, чем у крыс контрольной группы.

Так, у крыс контрольной группы значение ИС в среднем составило 2±0,06 отн.ед. У крыс с ЭЭВ (II группа) на всех сроках исследования данный показатель составил 1,1±0,01; 1,2±0,05; 1,4±0,05 и 1,3±0,06 отн.ед.

После введения гинодиксина реактивность нейтрофилов крови крыс (III группа) возрастала, и в эти же сроки составила 1,6±0,12; 1,6±0,06;, 1,8±0,12 и 2,1±0,09 отн.ед.

Таким образом, к 14 суткам наблюдения после введения гинодиксина реактивность нейтрофилов крови практически не отличалась от показателей в контрольной группе.


Таблица 1 – Показатели суммарного спонтанного и ЗГ-индуцированного ХЛ ответа нейтрофилов крови крыс различных групп


Период исследования (сут)

Суммарный ХЛ-ответ Нф (х105/103 Нф/20 мин)

спонтанный Isum

ЗГ-индуцированный Isum

1

7,4±0,48 * Х

12,0±0,79 * Х

14,2±0,70 Х

16,2±0,71 Х

3

7,0±0,34* Х

10,8±0,49* Х

5,1±0,53 Х

6,3±0,5 Х

7

5,3±0,38 Х

9,1±0,16 Х

6,3±0,38 Х

8,6±0,24

14

4,2±0,20* Х

8,8±0,36

6,9±0,47 Х

8,6±0,45

Контроль

3,8±0,17

7,4±0,26


Примечание: в числителе – данные крыс III-й группы, в знаменателе – II-й группы;

Х - достоверные различия по сравнению с контролем, при Р ≤ 0,05;

* - по сравнению с данными у крыс II-й группы, при Р ≤ 0,05


С целью установления степени нарушения баланса «оксидант-антиоксидант» в организме экспериментальных животных изучалось состояние прооксидантной (ПОА) и антиоксидантной (АОА) активности сыворотки крови.

Результаты исследования показали, что ПОА сыворотки крови крыс с ЭЭВ, а также на фоне гинодиксина повышается в течение первых трех суток воспаления на 50% и 44,4% соответственно, затем, постепенно снижаясь, приближается к контрольным значениям. АОА снижается в течение первых трех суток на 28% у крыс с ЭЭВ и на 9% на фоне гинодиксина. К концу исследования АОА повышается у крыс с ЭЭВ на 40%, с гинодиксином на 54% по сравнению с исходными данными и отличается от контрольных значений соответственно на 1,9 отн.ед (21,3%) и 0,4 отн.ед. (4,7%). В соответствии с этим уменьшается и значение коэффициента соотношения (Кс) ПОА/АОА, что говорит о преобладании антиоксидантных процессов (табл. 2).

Таким образом, исследованиями установлено, что у крыс с ЭЭВ антиоксидантный статус снижается, начиная с первых суток индукции воспаления. Максимальное снижение АОА сыворотки крови у крыс с ЭЭВ (II группа) наблюдается на 3 сутки после индукции воспаления, затем постепенно возрастает, но к 14 суткам она полностью не восстанавливается. Введение гинодиксина способствует восстановлению антиоксидантного статуса организма крыс к концу срока исследования.

Анализ расчета Кс сыворотки крови показал, что уже с первых суток после индукции ЭЭВ превалирует активность процессов свободно-радикального окисления на фоне снижения антиоксидантного статуса организма крыс, которое, вероятно, связано с усиленным потреблением антиоксидантов. Во II-й группе высокое значение Кс сохраняется до конца срока исследования (14 сут.). Введение гинодиксина крысам с ЭЭВ способствует снижению и нормализации к 14 суткам баланса в системе «оксидант-антиоксидант».

Таблица 2 – Показатели про- и антиоксидантной активности сыворотки крови крыс различных групп


Период исследования (сут)

ПОА, отн.ед.

АОА, отн.ед.

Кс

1

0,9 ± 0,06 Х

5,5 ± 0,36 Х

17,1 ± 1,29 Х

1,0 ± 0,03 Х

5,0 ± 0,14 Х

19,4 ± 0,99 Х

3

1,3 ± 0,06 Х

5,0 ± 0,19 Х *

25,6 ± 1,89 Х *

1,5 ± 0,07 Х

3,6 ± 0,16 Х

41,5 ± 0,30 Х

7

0,9 ± 0,06 Х

7,1 ± 0,28 Х *

12,7 ± 0,87 Х

0,8 ± 0,05 Х

5,8 ± 0,30 Х

13,4 ± 0,68 Х

14

0,6 ± 0,03

8,5 ± 0,33*

6,6 ± 0,20*

0,7 ± 0,04 Х

7,0 ± 0,25 Х

10,4 ± 0,94 Х

Контроль

0,5 ± 0,03

8,9 ± 0,32

5,1 ± 0,19


Примечание: в числителе – данные крыс III-й группы, в знаменателе – II-й группы;

Х - достоверные различия по сравнению с контролем, при Р ≤ 0,05;

* - по сравнению с данными у крыс II-й группы, при Р ≤ 0,05


Таким образом, гинодиксин обладает противовоспалительным действием, механизм которого обусловлен противоотечным эффектом, снижением АМК-генерирующей активности нейтрофилов крови и повышением их реактивности, а также активизацией антиоксидантных процессов в организме крыс.


2.2.2.3. Терапевтическая эффективность гинодиксина при

послеродовом гнойно-катаральном эндометрите у коров


Оценку терапевтической эффективности препарата при послеродовом гнойно-катаральном эндометрите проводили в ОПХ «Элитное» Новосибирской области. Для научных опытов использовали коров черно-пестрой породы, которые были разделены на опытную и контрольную группы. Животным опытной группы (n=24) внутриматочно вводили гинодиксин в дозе 100 мл с интервалом 48 часов. Животным контрольной группы (n=24) применяли фурапен согласно наставлению: по 1 суппозиторию 1 раз в день.

При использовании гинодиксина патологические выделения из влагалища уменьшались и становились прозрачными после 2 – 3-го введения. При лечении фурапеном положительная динамика наблюдалась на 6–7 сутки введения препарата. Количество лечебных процедур в опытной группе составило 6,1±0,32; в контрольной – 10,58±0,16. В опытной группе выздоровело 26 животных (96,3%), в контрольной – 18 (66,7%).

Из данных таблицы 3 следует, что терапевтический эффект применения гинодиксина составляет 96,3%, что на 29,6% больше по сравнению с контролем, при этом кратность введения препарата сокращается на 42,34% (4-5 введений).


Таблица 3 – Основные показатели терапевтической эффективности препаратов




п/п


Показатель

Группа

опытная

контрольная

1.

Количество больных коров, гол

27

27

2.

Выздоровело коров, гол

26

18

3.

Выздоровело коров, %

96,3

66,7

4.

Продолжительность бесплодия, дни

65,27 ± 6,44

97,53 ± 9,32

5.

Кратность введения препарата

6,1 ± 0,32

10,58 ± 0,16


При анализе гематологических показателей у больных эндометритом коров, содержание витамина Е и альфа-глобулинов находилось на нижней границе физиологической нормы. Щелочной резерв и количество эритроцитов были снижены на 26,15% и 32,32% соответственно.

При анализе данных после лечения в опытной группе выявили достоверное увеличение уровня альбуминов (на 10,25%), мочевины (на 23,09%); и активность АсАТ (на 34,73%); снижение содержания альфа- (на 12,89%), бетта-глобулинов (на 25,85%) и активности АлАТ (на 34,56%).

В контрольной группе наблюдали уменьшение концентрации витамина Е (на 28,57%), альфа- (на 13,97%), бета- (на 26,22%), гамма-глобулинов (на 4,55%), АлАТ (на 41,5%); увеличение содержания альбуминов (на 13,73%).

Производственное испытание терапевтической эффективности гинодиксина на поголовье коров численностью 165 голов, принадлежащих ОПХ «Элитное», ЗАО «Совхоз Морской», ООО «Моховское», показало, что лечебный эффект составил 93,7-96,7%. В контрольных группах терапевтическая эффективность составила 81,8-86,9%.


2.2.2.4. Оценка терапевтической эффективности

гинодиксина при серозном мастите у коров


Оценку эффективности лечения коров, больных серозным маститом, проводили в ООО «Моховское» Кемеровской области. Для этого по принципу аналогов были сформированы две группы – опытная и контрольная – по 32 гол. в каждой. Группы формировались из коров черно-пестрой породы, с характерными клиническими признаками серозного мастита.

Животных контрольной группы лечили мастисаном-А, опытной – гинодиксином. Препараты вводили в дозе 10 мл один раз в день интрацистернально, в течение 2-4 дней.

Эффективность лечения в группах составила 100%. Сроки лечения коров опытной группы были меньше в среднем на 10,6% (табл. 4). В процессе терапии не было отмечено осложнений, рецидивов и побочных эффектов после введения препаратов.

Лейкограмма, количество гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов и биохимические показатели сыворотки крови у опытных и контрольных коров до и после лечения препаратами соответствовали физиологической норме.


Таблица 4 – Основные показатели терапевтической эффективности препаратов


№ п/п

Показатель

Группа

опытная

контрольная

1.

Больных коров, четвертей

32

32

2.

Излечено коров, четвертей, %

100

100

3.

Сроки лечения, дни

3,13 ± 0,30

3,50 ± 0,27

4.

Эффективность лечения, %

100

100


Производственные испытания гинодиксина при серозном мастите, проведенные на 355 коровах в 3-х хозяйствах Новосибирской и Кемеровской областей, показали, что лечебный эффект составил 94,7-96,7%, в то время как в контрольных группах - 90,1-92,6%.


2.2.2.5. Экономическая эффективность гинодиксина при послеродовом

гнойно-катаральном эндометрите и серозном мастите у коров


Анализ применения гинодиксина при гнойно-катаральном эндометрите, показал, что экономическая эффективность мероприятий на рубль затрат составила 17,39 руб., в то время как при использовании фурапена – 13,25 руб., что в 1,31 раза выше.

При лечении коров больных серозным маститом с использованием гинодиксина и мастисана-А экономическая эффективность мероприятий на рубль затрат составила 27,45 руб. и 12,01 руб. соответственно. Из полученных данных можно сделать вывод о том, что применение гинодиксина при серозном мастите эффективнее мастисана-А в экономическом плане в 2,28 раза.


3. ВЫВОДЫ

1. У коров в структуре патологий репродуктивных органов, вызываемых условно-патогенной микрофлорой, преобладают мастит, эндометрит, задержание последа. Их доля составляет 6,44-38,07%; 2,8-14,99% и 2,8-10,16% соответственно.

2. В развитии послеродового эндометрита преимущественное значение имеет условно-патогенная микрофлора, относящаяся к родам: Enterobacter, Citrobacter, Staphylococcus, которая выявляется в ассоциациях с частотой 55,76-63,38% и проявляет наибольшую чувствительность к энрофлоксу, гинодиксину, тилану.

При серозном мастите изолировали преимущественно Staphylococcus, Streptococcus, которые наиболее чувствительны к гинодиксину. Частота выявления микрофлоры в ассоциациях составляет 78,5-83,3%.

3. Лекарственное средство гинодиксин, включающее в свой состав в качестве активнодействующих веществ 1,4-Ди-N-окись 2,3-бис (оксиметил) хиноксалин; трис (2-оксиэтил) аммония орто-крезоксиацетат обладает низкой токсичностью и высокой антиоксидантной активностью, которая проявляется снижением прооксидантного потенциала сыворотки крови у коров, больных эндометритом.

4. Индуцированное адъювантом Фрейнда экспериментальное экссудативное воспаление, сопровождается температурной реакцией, увеличением размера лапки на 73,6%, развитием окислительного стресса и повышением коэффициента соотношения ПОА/АОА в два раза (с 5,1±0,19 отн.ед. до 10,4±0,94 отн.ед.), а также активизацией окислительно-метаболической функции нейтрофилов крови, при сохранении низких показателей зимозан-индуцированного индекса и снижением реактивности нейтрофилов на 39,53% по сравнению с контрольными значениями.

5. Экспериментальное экссудативное воспаление на фоне применения гинодиксина протекает в условиях нормализации температуры, возрастания размера лапки на 11,1% и снижения реактивности нейтрофилов на 2,3%, восстановления баланса в системе оксидант-антиоксидант, что выражается снижением коэффициента соотношения ПОА/АОА сыворотки крови крыс на 29,41% по отношению к контролю.

6. Функциональные изменения нейтрофилов периферической крови и очага поражения при экспериментальном экссудативном воспалении на фоне гинодиксина характеризуются активизацией смены популяции полинуклеаров на мононуклеарные клетки и увеличением их в периферической крови на 73,5%, а в зоне поражения на 50%; снижением АМК-генерирующей функции нейтрофилов на 39,1% при одновременном повышении на 41,6% их хемилюминисцентного ответа на дополнительный ЗГ-индуцированный стимул. Реактивность нейтрофилов возрастает и превышает таковой показатель у крыс с экспериментальным экссудативным воспалением на 61,5% при индексе стимуляции 2,1±0,09 отн.ед.

7. Терапевтическая эффективность применения гинодиксина с интервалом 48 часов при послеродовом гнойно-катарального эндометрите составляет 93,7-96,7%, количество лечебных процедур сокращается на 42,3%, количество дней бесплодия - на 32,3%. Эффективность гинодиксина при серозном мастите у коров составляет 94,7%-100%, сроки лечения сокращаются на 10,6%.

8. Экономическая эффективность гинодиксина при лечении коров больных послеродовым гнойно-катаральным эндометритом и серозным маститом составляет 17,39 руб. и 9,86 руб. на 1 рубль затрат, соответственно.


  1. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ


Для лечения коров больных послеродовым гнойно-катаральным эндометритом у коров препарат рекомендуем вводить внутриматочно, по 100 мл с интервалом 48 час. Кратность введения – 4-8 дней.

При терапии серозного мастита у коров гинодиксин следует применять интрацистернально по 10 мл с интервалом 24 час. Курс лечения составляет 2-4 дня.

По результатам исследований подготовлены 2 методические рекомендации:

- «Применение ветеринарных препаратов на основе синтетического аналога фитогормона для профилактики и лечения заболеваний сельскохозяйственных животных», утвержденные подсекцией «Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока» отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (протокол № 3 от 14.09.2006 г.);

- «Фармакологические свойства и применение лекарственного средства гинодиксин в ветеринарии», утвержденные подсекцией «Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока» отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (протокол №3 от 13.10.2009 г.).


5. СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ

ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ


  1. Распутина, О.В. Оксидативный гомеостаз у стельных коров и при остром гнойно-катаральном эндометрите / О.В. Распутина, М.Н. Скомарова, Д.Д. Цырендоржиев // Ветеринария. – 2007. – № 1. – С. 35-39.

  2. Скомарова, М.Н. Противовоспалительные свойства ветеринарного лекарственного средства гинодиксин / М.Н. Скомарова, О.В. Распутина, Д.Д. Цырендоржиев, В.В. Курилин, М.А. Саперова, Н.А. Шкиль // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. – 2009. – № 11. – С. 77-84.

  3. Пат. 2287329 Российская Федерация. Препарат для лечения послеродового гнойно-катарального эндометрита и мастита у коров и способ его применения / Распутина О.В., Дровосекова М.Н., Дровосеков Н.А., Дольникова М.Н. – заявитель и патентообладатель ЗАО «Росветфарм»; заявл. 21.02.05 г.; опубл. 20.11.06 г.; Бюл. №32. – 9 с.

  4. Скомарова, М.Н. Эффективность гинодиксина при серозном мастите у коров / М.Н. Скомарова, О.В. Распутина, Н.А. Шкиль // Научные основы обеспечения защиты животных от экотоксикантов, радионуклидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний: Материалы междунар. симпозиума. – ФГУ Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных. – Казань. – 2005 г. – Часть 1. – С. 530-535.

  5. Скомарова, М.Н. Анализ заболеваемости коров маститами в Новосибирской области / М.Н. Скомарова, О.В. Распутина // Актуальные проблемы ветеринарной медицины: материалы VI Сибирской ветеринарной конференции. – НГАУ, Новосибирск. – 2006 г. – С. 87-88.

  6. Распутина, О.В. Оксидативно-антиоксидантный статус у коров, больных послеродовым эндометритом и возможность его коррекции / О.В. Распутина, М.Н. Скомарова, Д.Д. Цырендоржиев // Актуальные проблемы ветеринарии в современных условиях: Материалы междунар. науч.-практ. конф., посвященной 60-летию ГНУ Краснодарского НИВИ. – Краснодар. – 2006 г. – С. 366-368.

  7. Скомарова, М.Н. Влияние гинодиксина на биохимические показатели сыворотки крови коров, больных послеродовым эндометритом / М.Н. Скомарова, О.В. Распутина // Актуальные проблемы ветеринарии в современных условиях. Материалы междунар. науч.-практ. конф., посвященной 60-летию ГНУ Краснодарского НИВИ. – Краснодар. – 2006 г. – С. 379-381.

  8. Скомарова, М.Н. Снижение потерь и повышение качества сельскохозяйственной продукции при мастите у коров / М.Н. Скомарова, Л.В. Макаренко // Современные технологии производства и переработки сельскохозяйственной продукции: Сб. материалов междунар. науч.-практ. конф. – Новосибирск. – 2009 г. – С. 155-160.

  9. Скомарова, М.Н. Мониторинг акушерско-гинекологических патологий у коров в хозяйствах Новосибирского района / М.Н. Скомарова, О.В. Распутина, В.В. Теске // Актуальные вопросы ветеринарной медицины: Материалы II Сибирского ветеринарного конгресса. – НГАУ, Новосибирск. – 2010 г. – С. 98-100.


Добавить документ в свой блог или на сайт
Ваша оценка этого документа будет первой.
Ваша оценка:

Похожие:

Терапевтическая эффективность гинодиксина при эндометритах и маститах у коров, вызванных условно-патогенной микрофлорой 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 06. iconЛечебно профилактическая эффективность пробиотика лаксубтил при колибактериозе телят 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Терапевтическая эффективность гинодиксина при эндометритах и маститах у коров, вызванных условно-патогенной микрофлорой 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 06. iconАнтимикробная активность и лечебная эффективность тилоколина при бактериальных инфекциях органов дыхания поросят 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Терапевтическая эффективность гинодиксина при эндометритах и маститах у коров, вызванных условно-патогенной микрофлорой 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 06. iconАнтимикробная активность и лечебная эффективность комплексного препарата диоксинор при респираторных болезнях поросят 16. 00. 03 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Терапевтическая эффективность гинодиксина при эндометритах и маститах у коров, вызванных условно-патогенной микрофлорой 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 06. iconКлинико эпизоотологический мониторинг высокопродуктивных коров в племенных предприятиях свердловской области 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 06.

Терапевтическая эффективность гинодиксина при эндометритах и маститах у коров, вызванных условно-патогенной микрофлорой 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 06. iconМолекулярно-генетический анализ патогенных стрептококков возбудителей мастита коров в хозяйствах ленинградской области 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Терапевтическая эффективность гинодиксина при эндометритах и маститах у коров, вызванных условно-патогенной микрофлорой 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 06. iconФармакологическое обоснование применения тетраголда при колибактериозе поросят 06. 02. 03 ветеринарная фармакология и токсикология 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Терапевтическая эффективность гинодиксина при эндометритах и маститах у коров, вызванных условно-патогенной микрофлорой 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 06. iconЭпизоотологические особенности и эффективность специфической профилактики пневмовирусной инфекции (синдром опухшей головы) у цыплят-бройлеров 16. 00. 03 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Терапевтическая эффективность гинодиксина при эндометритах и маститах у коров, вызванных условно-патогенной микрофлорой 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 06. iconГемодинамические расстройства у поросят при колибактериозе и их коррекция 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Терапевтическая эффективность гинодиксина при эндометритах и маститах у коров, вызванных условно-патогенной микрофлорой 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 06. iconЭпизоотологический надзор и контроль при зоонозах в поволжском регионе 16. 00. 03 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Терапевтическая эффективность гинодиксина при эндометритах и маститах у коров, вызванных условно-патогенной микрофлорой 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 06. iconВлияние гликопина на иммуногенез у животных при комплексном применении с вакцинами 06. 02. 02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Поместите кнопку у себя на сайте:
Образование


База данных защищена авторским правом ©cow-leech 2000-2013
обратиться к администрации | правообладателям | пользователям
COW-LEECH.RU